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2007 年度 実績報告書

ゲノムの情報発現・分配・修復における細胞核アクチン関連タンパク質の機能解析

研究課題

研究課題/領域番号 18580087
研究機関東北大学

研究代表者

原田 昌彦  東北大学, 大学院・農学研究科, 准教授 (70218642)

キーワードゲノム / アクチン関連タンパク質 / クロマチン / DNA損傷修復 / 染色体分配 / 遺伝子発現制御
研究概要

hArp5のDNA修復への関与を解析する目的で、siRNAを用いてHeLa細胞のhArp5発現を抑制した。この細胞はDNA損傷への感受性が増大しているが、hArp5抗体を用いた解析からは、DNA損傷時にhArp5の核内局在に変化は観察されなかった。しかし、γ-H2AXに対する抗体で免疫染色およびウエスタンブロットを行ったところ、hArp5のノックダウンによってDNA損傷に伴うγ-H2AXの集積が阻害されることが示された。一方、hArp5を過剰発現した細胞では、DNA損傷に伴うγ-H2AXの集積が亢進していた。この結果は、hArp5がH2AXのリン酸化の機構を介してDNA修復に関与している可能性を示唆している。また、hArp8抗体を用いてhArp8の細胞内局在を観察したところ、GFP-hArp8の発現によって示唆されたと同様に、分裂期染色体上にhArp8が存在することが示された。これは、分裂期染色体上に存在するアクチンファミリーのはじめての例である。siRNAによるhArp8のノックダウンによって、分裂期染色体の赤道面への整列に異常が観察されたことから、hArp8がゲノムの安定な分配に寄与していることが明らかとなった。一方で、hIno80のノックダウンによっては染色体の整列の異常は観察されなかったことから、このhArp8の機能は、hIN080複合体には非依存的であることが示唆された。hArp8抗体カラムを用いて、hArp8を複合体の精製を試み、複合体の部分精製に成功した。

  • 研究成果

    (10件)

すべて 2008 2007 その他

すべて 雑誌論文 (4件) (うち査読あり 4件) 学会発表 (5件) 図書 (1件)

  • [雑誌論文] The actin-related protein hArp8 accumulates on the mitotic chromosomes and functions in chromosome alignment2008

    • 著者名/発表者名
      Aoyama, 他
    • 雑誌名

      Exp Cell Res 314

      ページ: 859-868

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 査読あり
  • [雑誌論文] The INO80 complex is required for damage-induced recombination.2007

    • 著者名/発表者名
      Kawashima, 他
    • 雑誌名

      Biochem Biophys Res Commun 355

      ページ: 835-841

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Ino80 Chromatin Remodeling Complex Promotes Recovery of Stalled Re plication Forks

    • 著者名/発表者名
      Shimada, 他
    • 雑誌名

      Current Biology (In press)

    • 査読あり
  • [雑誌論文] The nuclear actin-related protein Act3p/Arp4 influences yeast cell shape and bulk chromatin organization

    • 著者名/発表者名
      Miloshev, 他
    • 雑誌名

      J Cell Biochem (In press)

    • 査読あり
  • [学会発表] DNA二重鎖切断修復に関与するヒトアクチン関連タンパク質hArp5の機能解析2007

    • 著者名/発表者名
      加茂 真理子, 他
    • 学会等名
      第30回日本分子生物学会年会・第80回日本生化学会大会合同大会
    • 発表場所
      横浜
    • 年月日
      2007-12-12
    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [学会発表] Actin-related protein Arp4 functions in kinetochore assembly2007

    • 著者名/発表者名
      Satoshi Kawashima, 他
    • 学会等名
      第30回日本分子生物学会年会・第80回日本生化学会大会合同大会
    • 発表場所
      横浜
    • 年月日
      2007-12-12
    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [学会発表] 染色体ドメインの核内配置と遺伝子発現制御へのArp6 の関与2007

    • 著者名/発表者名
      吉田 貴人, 他
    • 学会等名
      酵母遺伝学フォーラム第40回年会
    • 発表場所
      大阪
    • 年月日
      2007-09-12
  • [学会発表] Actin-related protein hArp5: its nucleo-cytoplasmic shuttling and dynamic association with a chromatin remodeling enzyme2007

    • 著者名/発表者名
      Masahiko Harata, 他
    • 学会等名
      32nd FEBS Congress-Molecular Machines-
    • 発表場所
      Vienna, Austria
    • 年月日
      2007-07-10
    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [学会発表] ヒストンバリアントH2AZアイソフォームの同定と機能解析2007

    • 著者名/発表者名
      松田 涼, 他
    • 学会等名
      日本生化学会東北支部第73回例会シンポジウム
    • 発表場所
      仙台
    • 年月日
      2007-05-12
    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [図書] ベーシックマスター生化学2008

    • 著者名/発表者名
      原田昌彦, 他
    • 出版者
      オーム社(印刷中)

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公開日: 2010-02-04   更新日: 2016-04-21  

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