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タンパク質中のアスパラギンやアスパラギン酸残基は、異性化やラセミ化を起こしやすく、劣化に伴いイソアスパラギン酸やD-アスパラギン酸に変換される。一方、異性化やラセミ化を起こしたタンパク質の修復酵素として、protie isoaspartyl/D-aspartyl methyltransferase(PIMT)が知られている。本研究では、PIMTの生理的役割を解明する目的で、PIMTsiRNA発現ベクターを用いてPIMT発現抑制株を樹立し、それを用いて解析するとともに、PIMTの活性測定系の開発や発現調節機構の解析等を進めている。これまでに、コントロール細胞に比較しPIMT発現抑制株では成長因子刺激によるMAPKカスケード活性化が異常亢進することを見出しており、PIMTは細胞内シグナル伝達系が正常に機能するために重要な役割を果たしていることが示唆されてきている。現在は、その異常亢進機構解明に向け更なる解析を行っている段階にある。また別に、ヒト染色体DNAよりPIMTプロモーター領域をクローニングし、ルシフェラーゼレポーター遺伝子に組み込むことによりPIMTプロモーターの活性測定系を確立し、本測定系を用いてプロモーター領域の解析を行った。その結果、本プロモーター上に転写活性に必須の領域および活性を正または負に制御する領域が存在することが明らかとなった。そこで今後は、ゲルシフトアッセイやDNAアフィニティークロマトグラフィーを用いた精製等を行い、これら領域に結合する転写因子の同定に向け解析を進めていく予定である。
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