| 研究概要 |
テロメアは真核生物の染色体末端であり、ヒトではTTAGGGの塩基繰り返し配列を持っている。テロメアを伸長する酵素がテロメラーゼであり、腫瘍細胞の85%に活性が見られ、テロメラーゼは細胞の不死化と密接な関係がある。テロメラーゼはテロメアー本鎖構造に結合するが、その一本鎖が四重鎖構造をとるとテロメラーゼはもはやテロメアには結合できず、腫瘍細胞は死滅することが報告されている。テロメア四重鎖を安定化するカチオン性ポルフィリンTMPyP4はテロメラーゼ阻害活性と抗腫瘍細胞活性を示すことがわかっている。そこで私はTMPyP4の4つの類似体pPy,pTm,mPy,mTmがどのようにテロメア四重鎖DNAに結合しているのかを探るために、X線結晶構造解析を行うことを目的としたカチオン性ポルフィリン-テロメア四重鎖DNA複合体の単結晶化を行った。操作は次のようにして行った。合成したDNAをアニーリングし四重鎖構造をとらせたのち、そこにポルフィリンを加え遠心分離した後上清を分取した。次に結晶化をシッティングドロップ法により10度から20度の範囲で行った。いくつかの結晶化条件より赤色の微結晶あるいは針状結晶を得た。ポルフィリンは赤色なので、この結晶はDNA-ポルフィリン複合体、あるいはポルフィリン単体の結晶であると考えられる。しかし、大きさや形状がX線照射には不向きであると考えられた。引き続き良質の単結晶を得るべく実験を行っている。
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