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2007 年度 実績報告書

超微細レベルでの情報伝達機序解析

研究課題

研究課題/領域番号 18590184
研究機関名古屋大学

研究代表者

藤田 秋一  名古屋大学, 大学院・医学研究科, 准教授 (60282232)

研究分担者 藤本 豊士  名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (50115929)
キーワード細胞膜 / 脂質 / ラフト / 糖脂質 / コレステロール / ミクロドメイン / 空間統計 / 情報伝達
研究概要

生きた細胞の細胞膜上ではスフィンゴ脂質やコレステロールが豊富なラフトと呼ばれるミクロドメインが想定されているが,実際に存在するかはわかっておらず,申請者らは電顕を用いて直接ラフトを観察することを試みた.しかし従来の化学固定法では脂質を固定することはできず,本研究では急速凍結およびSDS処理凍結割断レプリカ標識(SDS-FRL)法を用いた.このSDS-FRL法では細胞膜内分子をレプリカ膜(以下,薄膜)で物理的に固定することができるので,生きた細胞の状態を保持したまま超微細レベルでの脂質の可視化が期待できる.そこで申請者らは,この白金・カーボン薄膜によってできた脂質レプリカ膜ではSDS処置後でも元の脂質の約80%が保持されていることを明らかにし,SDS-FRL法が細胞膜での脂質分布を検索するのに有効な手段であることを証明した(Histochem.Cell Bion.128,385,2007).平成18年度における研究によって,ラフトの主要構成分子であるGM1が平均直径96nmのクラスターを形成していることがわかった.またラフト構造の維持に重要なコレステロールを除去した細胞由来の薄膜ではGM1の分布パターンはランダム分布が細胞膜全体の約30%にまで増加していた.また,ラフトの主要構成分子であるGM3もコレステロール依存性のクラスターを形成しており,ほとんどの場合GM1とは別のクラスターを形成していることもわかった.平成19年度では,このアクチン線維の脱重合薬であるLatruculin Aを処置することにより,GM1とGM3が別々のクラスターではなく,共通のドメインを形成するようになることがわかった.

  • 研究成果

    (6件)

すべて 2008 2007 その他

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (2件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Gangliosides GM1 and GM3 in the living cell membrane form clusters susceptible to cholesterol depletion and chilling.2007

    • 著者名/発表者名
      Fujita A.
    • 雑誌名

      Mol. Biol. Cell. 18

      ページ: 2112-2122

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Quantitative retention of membrane lipids in the freeze-fracture replica.2007

    • 著者名/発表者名
      Fujita A.
    • 雑誌名

      Histochem. Cell Biol. 128

      ページ: 385-389

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 査読あり
  • [雑誌論文] All-trans-retinol generated by rhodopsin photobleaching induces rapid recruitment of TIP47 to lipid droplets in the retinal pigment epithelium.2007

    • 著者名/発表者名
      Tsuiki E.
    • 雑誌名

      Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 48

      ページ: 2858-2867

    • 査読あり
  • [学会発表] 免疫電顕を用いたイノシトール燐脂質分布の可視化2008

    • 著者名/発表者名
      藤田 秋一
    • 学会等名
      日本解剖学会総会
    • 発表場所
      大分市
    • 年月日
      2008-03-27
  • [学会発表] 凍結割断レプリカ標識法を用いた膜脂質局在の解析2007

    • 著者名/発表者名
      藤田 秋一, 藤本 豊士
    • 学会等名
      日本顕微鏡学会・学術講演会
    • 発表場所
      新潟市
    • 年月日
      20070520-22
    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [備考]

    • URL

      http://www.med.nagoya-u.ac.jp/pdf01/A11070000000000000000000050000005.pdf

URL: 

公開日: 2010-02-04   更新日: 2016-04-21  

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