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本申請は、計画1)「配偶子特異的なDNAメチル化制御因子の同定と機能解析」と計画2)「加齢に伴う卵子核のエピジェネティックな修飾状態の変化解析」の二つの研究項目を立てて推進した。
計画1)「配偶子特異的なDNAメチル化制御因子の同定と機能解析」
DNAメチル化酵素関連因子Dnmt3Lは、生殖細胞の分化過程で複合体を形成し、特異的なゲノム領域のDNAメチル化を行っていると推測される。そこで、Dnmt3Lと相互作用するタンパク質の候補因子を同定し、培養細胞中で強制発現させて、その機能を解析中である。また、マウスES細胞を用い、候補因子のターゲティングによる機能解析を準備中である。
計画2)「加齢に伴う卵子核のエピジェネティックな修飾状態の変化解析」
マウスを過排卵させ、体細胞の混入が可能な限り少ない回収法を確立し、少量ずつ回収した試料を凍結保存している。少数の試料を用いて予備的に行った実験では、回収されたDNAとRNA共に質が悪く、回収方法あるいは保存方法の変更が必要であることが懸念され、現在手技の改良点を検討中である。
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