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2007 年度 実績報告書

マイナス鎖RNAウイルスの細胞馴化によるポリメラーゼの変異と病原性の変化

研究課題

研究課題/領域番号 18590450
研究機関九州大学

研究代表者

竹田 誠  九州大学, 大学院・医学研究院, 准教授 (40311401)

キーワード麻疹ウイルス / ポリメラーゼ / 病原性 / 弱毒化 / マイナス鎖RNAウイルス
研究概要

麻疹に対しては、特異的な治療法がなく、ワクチン接種による予防が重要である。有効な弱毒生ワクチンが開発されているが、生ワクチンの弱毒化の分子基盤は分かっていない。そこで本研究では、麻疹ウイルス(マイナス鎖RNAウイルス)を人工的に改変する技術を用いて、麻疹ウイルスワクチン株の弱毒化とウイルスポリメラーゼの機能との関係について解析を行った。
麻疹ウイルスのゲノムにはN、P、M、F、H、Lの6つの遺伝子がコードされている。このうちPとLのふたつの遺伝子がウイルスポリメラーゼをコードしている。病原性を保持している病原株IC-B株と、病原性を持たないEdmonstonワクチン株のPやL遺伝子を相互に組換えたウィルス、あるいは、ゲノムの3'末端のプロモータ領域を相互に組換えたウイルスなど、十数種類の組換えウイルスを合成した。ウイルスの増殖を視覚的に容易に観察するために、一部のウイルスには緑色蛍光タンパク質をコードする遺伝子を組込んだ。また、ウイルス遺伝子発現のレベルを容易かつ定量的に解析するために、その他のウイルスにはルシフェラーゼ遺伝子を組込んだ。
これらの組換えウイルスを血球系、上皮系などの様々なヒト細胞に感染させ、ウイルスの増殖の程度や遺伝子発現のレベルを定量的に解析した。その結果、ワクチン株のウイルスポリメラーゼの活性が、野生型ウイルスのポリメラーゼに較べて大きく低下していることが証明された。
さらに麻疹ウイルス受容体を発現するマウスを作出することにより、麻疹ウイルスの感染小動物モデルを確立した。本モデルを用いることにより、P、L遺伝子の変化が、ワクチン株の弱毒化に大いに関与していることが明らかになった。

  • 研究成果

    (12件)

すべて 2008 2007 その他

すべて 雑誌論文 (7件) (うち査読あり 7件) 学会発表 (4件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Measles virus infects both polarized epithelial and immune cells using distinctive receptor-binding sites on its hemagglutinin2008

    • 著者名/発表者名
      Tahara, et. al.
    • 雑誌名

      Journal of Virology 82(印刷中)

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Homogeneous sugar modification improves crystallization of measles virus hemagglutinin2008

    • 著者名/発表者名
      Hashiguchi, et. al.
    • 雑誌名

      Journal of Virological Methods (印刷中)

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Crystal structure of measles virus hemagglutinin provides insight into effective vaccines2007

    • 著者名/発表者名
      Hashiguchi, et. al.
    • 雑誌名

      Proc Natl Acad Sci USA. 104

      ページ: 19535-40

    • 査読あり
  • [雑誌論文] A Human Lung Carcinoma Cell Line Supports Efficient Measles Virus Growth and Syncytium Formation via SLAM-and CD46-Independent Mechanism2007

    • 著者名/発表者名
      Takeda, et. al.
    • 雑誌名

      Journal of Virology 81

      ページ: 12091-6

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Altered interaction of the matrix protein with the cytoplasmic tail of hemagglutinin modulates measles virus growth by affecting virus assembly and cell-cell fusion2007

    • 著者名/発表者名
      Tahara, et. al.
    • 雑誌名

      Journal of Virology 81

      ページ: 6827-36

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Multiple amino acid substitutions in hemagglutinin are necessary for wild-type measles virus to acquire the ability to use receptor CD46 efficiently2007

    • 著者名/発表者名
      Tahara, et. al.
    • 雑誌名

      Journal of Virology 104

      ページ: 2564-72

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Measles virus infection of SLAM(CD150)knockin mice reproduces tropism and immunosuppression in human infection2007

    • 著者名/発表者名
      Ohno, et. al.
    • 雑誌名

      Journal of Virology 104

      ページ: 1650-9

    • 査読あり
  • [学会発表] 肺癌細胞株を用いた麻疹ウイルスの新たな感染機構の解析2007

    • 著者名/発表者名
      竹田 誠, ら
    • 学会等名
      第55回日本ウイルス学会
    • 発表場所
      札幌市
    • 年月日
      20071000
  • [学会発表] 麻疹ウイルスワクチン株の培養細胞馴化による弱毒化の分子基盤:ポリメラーゼとプロモーターの変異の意義について2007

    • 著者名/発表者名
      竹田 誠, ら
    • 学会等名
      第44回日本ウイルス学会九州支部総会
    • 発表場所
      長崎市
    • 年月日
      20071000
  • [学会発表] Mechanism of measles virus infection in SLAM-negative cells:A novel pathway to spread efficiently in human lung carcinoma cells2007

    • 著者名/発表者名
      Takeda, et. al.
    • 学会等名
      Workshop on Replication and Cell Biology of Negative Strand RNA Viruses.
    • 発表場所
      米国イリノイ州エバンストン市
    • 年月日
      20070900
  • [学会発表] Application of engineered measles virus with a segmented RNA genome to vector development2007

    • 著者名/発表者名
      Takeda, et. al.
    • 学会等名
      ASM 107th general meeting
    • 発表場所
      カナダトロント市
    • 年月日
      20070500
  • [備考]

    • URL

      http://www.med.kyushu-u.ac.jp/virus/

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公開日: 2010-02-04   更新日: 2016-04-21  

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