研究課題
基盤研究(C)
癌の臨床症例において、PROX1の発現や変異の調査:肝臓がん症例を用いて検証した結果、PROX1の発現と癌の文化度や患者の生命予後との間に相関関係があり、PROX1の発現が低い程文化度が低く、また生命予後も悪い事が有意に示された。膵臓がんでも、未文化のものであるほどPROX1の発現量が低いことが示された。がん細胞株でPROX1のゲノムDNAをシーケンスにかけて検索したところ変異は指摘されなかったが、同じ細胞株のRNAを回収し逆転写反応を行って得たcDNAで特定の4カ所でアデノシンからグアノシンへの同じパターンの変異が起きていることが分かった。膵がん細胞株2種類と大腸がん細胞株1種類において、PROX1の変異がゲノムではなくRNA上で起きていることが分かった。PROX1の機能解析:まずsiRNAの実験系でPROX1の発現を抑えると細胞の増殖能は亢進し、逆にプラスミドを導入してPROX1を強制発現させると増殖能が低下することを証明した。次にTet-off/Tet-on Gene expression systemを用いて、野生型PROX1を過剰発現したものと、RNA変異を来したmutant PROX1を過剰発現したもの、及びコントロール細胞との間で機能の差異について比較検討を行った。野生型PROX1には増殖抑制作用があり、それがmutant PROX1では失われていることが示された。マウスを用いたin vivo実験でも同じ結果が得られ、野生型では腫瘍縮小効果が認められたがmutant PROX1では腫瘍のサイズはほとんど変化を認めなかった。PROX1は細胞増殖を抑制し、変異によってその機能が失われることが、vitroとvivo双方の実験で証明された。
すべて 2006
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