| 研究概要 |
上皮細胞が間葉系細胞に転換する現象epithelial mesenchymal transiton(EMT)は,肝細胞,腎尿細管上皮細胞,肺胞上皮細胞で確認されている。種々因子の関与を除くため,今回はin vitroの培養系,Air-liquid interface(ALI)によるマウス気管上皮の初代培養細胞mouse tracheal epithehal cell(mTEC)を用いた.TGFβ13ng/mLを添加した群と非添加群の間で経時的な観察を行った.
間葉系細胞マーカーとしてはαSMA, vimentin, desmin, conagen 1, MMP-1を,上皮系細胞マーカーとしてはZo-1, β-catenin, aquporin-5, TTF-1, E-cadherinを検討した.
TGF-βを添加する前には上皮系細胞マーカーが陽性であったが,2週間後の蛍光免疫染色により,これらは発現量が低下〜消失した.一方,間葉系細胞マーカーは2週間後に陽性となった.発現量は1週目,2週目と増加しており,Western blottingによりαSMAの産生増,またβcateninの発現低下が認められた.
現在,ヒトtype II肺胞上皮細胞株,A549細胞を用いて同様の検討を行っている。また,周期との関連をチェックするため,pRBとp27の免疫組織化学染色を行っている.
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