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これまでの研究から緩徐発症1型糖尿病において、抗グルタミン酸脱炭酸酵素(GAD65)抗体の抗体価が、将来のインスリン依存状態進展を予知する指標となり得ることが我々の研究で明らかになっている。さらに、抗GAD65抗体の抗原認識部位(エピトープ)を解析することで、より正確に予知が可能となることもわかりつつある。本研究では、抗GAD65抗体の詳細なエピトープ解析に基づく高感度進展予知法の開発を試みた。
1.GADのファージディスプレイライブラリーの同定: 平成18年度に作成したヒト膵島由来GAD65ランダムファージディスプレイライブラリーを、健常人血清、緩徐発症1型糖尿病患者血清でスクリーニングし、各血清が認識するGAD65エピトープを同定した。
2.抗GAD抗体エピトープ解析システムの構築:上記研究で得られた情報を元に、緩徐発症1型糖尿病におけるインスリン依存への進行と関連があると考えられるGAD65エピトープを複数選択し、サンドウィッチELISA法の手法を駆使し、いろいろな試薬を用いて各血清IgGの結合を検討したが、Noise/Signal比が低く、解析システムを構築するに耐えうるエピトープの選定には至っていない。今後、インスリン依存への進行に特異的なエピトープを同定を目的に、RIA法など他の手法での検討や遺伝因子との関連についての検討も加え、マススクリーニングに適した簡便な測定系の確立を計画している。
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