| 研究課題/領域番号 |
18591126
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| 研究機関 | 聖マリアンナ医科大学 |
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研究代表者 |
増子 佳世 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 講師 (80288208)
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| 研究分担者 |
加藤 智啓 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 教授 (80233807)
中村 洋 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 非常勤講師 (80227933)
遊道 和雄 聖マリアンナ医科大学, 難病治療研究センター, 准教授 (60272928)
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| キーワード | 軟骨細胞 / 変形性関節症 / 関節リウマチ / 脂質メディエータ / スフィンゴシン / SIP / プロテオグリカン / プロスタグランジン |
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| 研究概要 |
【目的】脂質メディエータが、ヒト関節疾患(関節リウマチ、変形性関節症等)における骨軟骨変性にいかに関与しているかを明らかにする。【背景】昨年度我々は、ヒト関節軟骨細胞が、スフィンゴシン1リン酸(sphingosine-1-phosphate;S1P)に対するG蛋白結合受容体EDG/S1PRを発現していること、また軟骨細胞をS1Pで刺激すると、シクロオキシゲナーゼ(COX)-2の発現増強を伴うプロスタグランジン(PG)E2の産生増加がみられることを報告した。またS1P刺激軟骨細胞では、プロテオグリカン・アグリカンの発現が低下する可能性を見いだした。本年度はS1Pの軟骨細胞に対する異化作用をさらに検討するため、ヒト軟骨細胞を用いて次の実験を行なった。【方法】各関節疾患および外傷患者より、患者のインフォームドコンセントを得て手術時に採取した軟骨より軟骨細胞を分離し、単層培養した。これら培養ヒト関節軟骨細胞を、各濃度のS1Pにより試験管内で一定期間刺激した。培養後の軟骨細胞から、定法に従いmRNA,培養上清、ライゼート等を抽出し、S1P刺激前後での軟骨細胞における各種マーカーやサイトカイン産生等を比較した。
【結果】1.S1P刺激後の軟骨細胞では、アグリカン産生量の減少が認められた。この減少は、COX阻害薬meloxicamでの前処理により抑制され、また添加S1Pの用量依存性に認められた。OA由来軟骨細胞・外傷由来軟骨細胞とも同様の所見が認められた。2.GPCR阻害薬pertussis toxin(PTX)で軟骨細胞を前処理したところ、アグリカン産生低下はPTXの用量依存性に抑制された。4.S1P添加により、軟骨細胞でのアグリカンmRNA発現低下が認められ、転写レベルでの抑制が考えられた。
【考察】S1Pおよびその受容体を介したシグナルが、ヒト軟骨細胞において、プロテオグリカン発現低下を介して関節疾患における軟骨変性に関与している可能性が示唆された。
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