| 研究課題/領域番号 |
18591190
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
小児科学
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| 研究機関 | 高知大学 |
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研究代表者 |
脇口 宏 高知大学, 医学部, 教授 (10116519)
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| 研究分担者 |
前田 明彦 高知大学, 医学部附属病院, 講師 (50335931)
今井 章介 高知大学, 医学部, 教授 (60232592)
藤枝 幹也 高知大学, 医学部, 准教授 (60209020)
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| 研究期間 (年度) |
2006 – 2007
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| キーワード | EBウイルス / 感染症 / 遺伝子治療 / CTL活性 / サイトカイン |
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| 研究概要 |
慢性活動性EBV感染症、その他のEBV関連難治性疾患に対する治療はまだ確立されたものがない。EBVNA1は全てのEBV感染細胞に表出される潜伏抗原で、EBV増幅に必須の遺伝子である。当研究グループは独自にEBV episomeを駆逐する分子dnEBNA1を作成し、EBV陽性B細胞株からEBVゲノムの放逐に成功した。その結果、EBV陽性細胞株は悪性度を喪失すること、EBVゲノム放逐機序がwtEBNA1との競合に加え、wtEBNA1転写プロモーター(Qp)EBNA1合成を阻害することを明らかにした(Mol Ther 11(4):578-590.2005)。
当該年度はdnEBNA1によるEBV感染T、NK細胞株からのEBVゲノム脱落と増殖力の低下の有無を検討した。又、免疫療法併用の可能性を探るために、tetramer解析によるEBV特異的CTL活性を測定した。
1)EBV感染NK、T、上皮細胞株にdnEBNA1を導入したところ、導入3日後のEBVゲノム量は約40〜45%に、5〜6日後には約20〜40%に減少した。その後、NK細胞株は9日まで観察したが、それ以上の減少はなかった。
2)EBV脱落細胞株は親細胞に比して細胞倍加時間の延長、増殖力とコロニー形性能が低下し、NK細胞株に最も顕著にみられた。すなわち、細胞悪性度はT細胞、NK細胞、上皮細胞もEBVの存在に依存することが明らかになった。
3)EBV脱落T、NK細胞株では親細胞株に比してインターロイキン9産生能が著明に低下した。
4)EBV感染T、NK細胞はEBV特異的CTLの標的感受性は見られなかった。また、tetramer解析による慢性活動性EBV感染症のCTL活性は著しく低下していた。
以上の成績から、dnEBNA1はEBV関連腫瘍の治療についてB細胞性リンパ腫だけでなく、T、NK細胞性リンパ腫についても有効な遺伝子治療用分子になる可能性が示された
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