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研究第二年度はRSV感染マウスの肺におけるSOCSの発現を検討した。
RSV感染後のSOCS-3の発現について経時的に免疫組織学的で検討した。8週齢の雌のBalb/cマウスにRSV-A2株を経鼻より10^7pfu感染させ、感染後2時間、24時間、4日目、8日目に肺を採取し、4%パラホルムアルデヒドで固定し、パラフィン包埋した肺標本を抗SOCS-3抗体を用いて染色した。昨年度同様、感染直前の標本では線毛上皮、非線毛上皮を問わず細気管支上皮ではSOCS-3の陽性シグナルが認められたが、肺胞気管支、また扁平上皮化生を認める主気管支レペルでのSOCS-3のシグナルは観察されなかった。SOCS-3の発現はRSV感染後では感染前を100%とした場合、感染2時間では50-70%、感染24時間では10-30%、感染4日目では30%、感染8日目では10-30%であった。同時に行った紫外線不活化RSVを用いた実験では、感染後2時間から4日目までの発現は同様であったが、8日目の時点では70-80%に回復していた。
一方、培養上清に含まれる生理活性物質によるSOCS3発現への影響が考えられるため、超遠心による精製RSVを用い感染後2時間、4時間、8時間、24時間、2日目、4日目、8日目、14日目に標本を採取した。免疫染色、RNAレベル、蛋白レベルで解析中である。
また、年度早々にSOCSに対するsiRNAを用いた動物実験を実施するため、現在準備中である。
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