| 研究概要 |
正常ヒト皮膚線維芽細胞において,N-methylethanolamine (MEA:phospholipase D 阻害剤)は,濃度依存性にI型コラーゲンmRNAおよび蛋白の発現とCTGFmRNAの発現を抑制し,MMP-1mRNAおよび蛋白の発現を亢進した。これらのMEAの作用はTGF-βシグナル伝達経路とは独立した経路によるものであることを示し,I型コラーゲン遺伝子発現の抑制はMEK/ERKを介したものであること,MMP-1遺伝子発現の亢進にはMEK/ERKおよびJNKによる正の制御,p38MAPKによる負の制御が関与していることを明らかにした。よりin vivOに近い三次元培養系においても,細胞層中のハイドロキシプロリン量,培養液中の1型コラーゲン量は,いずれもMEA添加により低下していた。以上より,in vivoにおけるMEAの抗線維化作用を明らかになった。次に,in vivoにおけるMEAの抗線維化作用について検討した。はじめに予備実験としてICRマウスの背部に,0.1,1,10%MEA溶液を4週間連日塗布したところ,肉眼的,組織学的に明らかな皮膚障害は見られなかった。ブレオマイシン含有ポリ乳酸マイクロスフェアーによる皮膚線維化モデルマウスを用いて,MEA(N-methyletlianolamine)のin vivoにおける効果を検討した。皮膚線維化モデルマウスにMEA軟膏を3週間外用したところ,コントロールに比べて線維化した真皮の厚さは有意に減少した。また,I型コラーゲンおよびCTGFのmRNA発現はコントロールと比較して有意に減少し,MMP-13のmRNA発現は有意に増加していた。以上より,phosphohpase D阻害剤であるMEAの外用が皮膚線維性疾患の改善に有用である可能性が示唆された。
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