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1.miRNAの発現プロファイルの作製
約30例の食道癌検体についてTaqman PCRを用いて73種類のmiRNAの発現を定量した。miR-21、miR-25、miR-27b、miR-129、miR-130b、miR-139は、癌部で発現上昇の傾向がみられた。miR-34bは一部症例では、正常部に全く発現がみられず、癌部のみで発現がみられた。
またmiR-23a、miR-26a、miR-27b、miR-96、miR-128b、miR-129は発現の高いものは予後不良であった。
2.発現パターンに特徴のあるmiRNAの同定
上記のうち、まずmiR-34b、miR-21に着目した。Has-miR-21のターゲット遺伝子としてPLAG1、p85α(PIK3R1)が候補として挙げられており、has-miR-34bのターゲットとして、DLL1が挙げられている。
3.miRNAの解析
miR-21に関して、vectorを用いた発現解析実験とRNAi法を用いた発現抑制実験を食道癌細胞株を用いて行った。その結果、miR-21を発現させると腫瘍が増殖し、inhibitorを用いて発現抑制すると腫瘍の増殖抑制が起こった。このため、mir-21は治療のターゲットとして有用であると思われ、今後治療の応用を目指し、vivoでの実験を行い、さらに解析を進める予定である。
また論文投稿の準備を終了した。
さらに、miR-34b、miR-139、miR-129に関してもinhibitorを用いた実験を行ったが、現在までには有意な差は得られなかった。
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