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2007 年度 実績報告書

生殖細胞の発生・分化に関わる遺伝子の同定およびその機能解析

研究課題

研究課題/領域番号 18591766
研究機関名古屋市立大学

研究代表者

林 祐太郎  名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 准教授 (40238134)

研究分担者 小島 祥敬  名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 助教 (60305539)
丸山 哲史  名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 研究員 (50305546)
キーワード生殖細胞 / 精子形成 / Subtraction法 / 培養条件 / グルコース
研究概要

生殖細胞特異的に発現するMvh遺伝子座にGFP,lacZ遺伝子をknock-inしたES細胞株では生殖細胞分化を可視化でき、この系では培養液中グルコース濃度によって分化能が異なる。我々はグルコース濃度によって発現変化する遺伝子を前年度までに同定しており、このうち3遺伝子(Txnip,Pttg,RuvB12)について更なる検討を行った。
発現差の確認のため、3遺伝子についてNorthern Blotting、定量RT-PCR法を行った。Txnipは8585±2735倍、Pttgは5.93±0.19倍、RuvB12は2.16±0.12倍の発現差を示していた。3遺伝子とも精巣特異的ではないが、in situ hybridization法によりマウス性腺における局在を検討したところ、いずれも性分化の起こる胎生12.5日目から発現が見られ、新生仔〜成獣に至るまで精巣での発現を確認できた。精子形成細胞を欠損したW/Wvマウス精巣での検討から、TxnipはSertoli細胞で発現することが確認でき、Pttg、RuvB12遺伝子は精細管stage特異的に、精母細胞および精子細胞に発現していることを明らかとした。RuvB12についてはペプチド抗体を作成し、精巣におけるタンパク発現も検討した。さらにRuvB12-GFP融合タンパクを作成し、RuvB12遺伝子の細胞内挙動を検討した。その結果、細胞質に局在する細胞と核質に局在する細胞の2種類が観察され、従来報告されていた核内での働きの他に細胞質での機能を示唆する結果となった。
本研究により、培養下での生殖細胞分化と糖代謝との間に何らかの関連があることが明らかとなった。さらに精巣には糖代謝に関わる酵素のうち特異的isoformが数多く存在することが報告されており、今回同定した遺伝子が成獣精巣でも発現していたことから、精子形成過程にも糖代謝が重要な役割をもつことが明らかとなった。

  • 研究成果

    (7件)

すべて 2007

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (4件)

  • [雑誌論文] Ventral based dartos flap for the prevention of the urethrocutaneous fistula urethroplasty.2007

    • 著者名/発表者名
      Yutaro Hayashi
    • 雑誌名

      International Journal of Urology 14

      ページ: 725-728

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Can a slit-like meatus be achieved with the V-incision sutured meatoplasty for onlay island flap hypospadias repair?2007

    • 著者名/発表者名
      Yutaro Hayashi
    • 雑誌名

      BJU international 99

      ページ: 1479-1482

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Management of urethral calculi associated with hairballs after urethroplasty for severe hypospadias.2007

    • 著者名/発表者名
      Yutaro Hayashi
    • 雑誌名

      International Journal of Urology 14

      ページ: 161-163

    • 査読あり
  • [学会発表] One stage hypospadias repair for severe hypospadias: experience with Koyanagi technique in 59 patients2007

    • 著者名/発表者名
      Yutaro Hayashi
    • 学会等名
      2th World Congress on Hypospadias and Disorders of Sex Development
    • 発表場所
      ローマ市・イタリア
    • 年月日
      2007-11-16
  • [学会発表] Ventral based dartos flap for the prevention of the urethrocutaneous fistula on hypospadias urethroplasty2007

    • 著者名/発表者名
      Yutaro Hayashi
    • 学会等名
      第29回国際泌尿器科学会
    • 発表場所
      パリ市・フランス
    • 年月日
      2007-09-02
    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [学会発表] Can a slit-like meatus be achieved with the V incision sutured meatoplasty for on lay island flap hypospadias repair?2007

    • 著者名/発表者名
      Yutaro Hayashi
    • 学会等名
      第29回国際泌尿器科学会
    • 発表場所
      パリ市・フランス
    • 年月日
      2007-09-02
  • [学会発表] 尿道下裂の手術治療アルゴリズムの作成と実践2007

    • 著者名/発表者名
      林 祐太郎
    • 学会等名
      第95回日本泌尿器科学会総会
    • 発表場所
      神戸市
    • 年月日
      2007-04-14

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公開日: 2010-02-04   更新日: 2016-04-21  

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