| 研究概要 |
エラー!DNA修復欠損マウスの精子形成不全とDNA修復ネットワーク異常との関係に着目し、精巣の遺伝的安定性を維持するDNA修復ネットワークを解明するため、以下の実験を行い結論を得た。
12ケ月令DNA修復欠損マウス精巣からRNAを抽出し、DNA修復関連遺伝子[塩基除去修復(BER)、ヌクレオチド除去修復蛋白質(NER)、損傷乗り越え修復蛋白質(TLS)、ミスマッチ修復(MMR)等]の発現をDNA microarrayで網羅的に解析したところ、各修復関連遺伝子の発現異常を検出した。これらの遺伝子の発現の変化を確認するため、RT-PCR (reverse transcription PCR)、免疫染色、Western blotting, Real-time PCR等で解析中である。同時に、DNA修復欠損マウス精巣に酸化的DNA損傷を積極的に蓄積させ精子形成異常を生じる実験条件を、予備的に検討して最適な条件を見いだしたので、現在、個体数を増やして確認中である。その条件で、上記の同様の解析を行う。
また、NERを欠損したXPGマウスにおいても、精巣発育不全や卵巣発育不全を生じることが明らかになり、現在、精巣・卵巣の時期特異的な蛋白質の発現を解析中である。今回、電顕の染色剤として白金ブルーの染色特性が明らかになったことで、今後、白金ブルーを用いて精子形成過程の細胞の染色体を特異的に染色し、精子形成不全の病態に迫れる可能性がある。
上記の実験からDNA修復欠損マウスの精子形成不全とDNA修復ネットワーク異常との関係を理解し、精巣の遺伝的安定性を維持するDNA修復ネットワーク機構が解明される。
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