婦人科癌幹細胞の同定とそれに基づく癌幹細胞を標的とした新たな治療法の開発

2008 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18591826
• 研究機関: 富山大学
• 研究代表者: 岡部 素典 富山大学, 大学院・医学薬学研究部, 助教 (60283066)
• 研究分担者: 二階堂 敏雄 富山大学, 大学院・医学薬学研究部, 教授 (50180568) ; 吉田 淑子 富山大学, 大学院・医学薬学研究部, 准教授 (00171421)
• キーワード: 癌幹細胞 / 組織幹細胞 / 婦人科組織 / 幹細胞マーカー / 組織アレイ

研究概要

癌は自己複製能が破綻した病気であり、腫瘍化したクローンの増殖を支持する原発細胞の同定および制御は癌研究および癌治療を考えるうえで重要である。この原発細胞は自己複製しつつそれぞれの組織に分化する組織幹細胞との共通性が高いことから癌幹細胞の概念が導入されている。
そこで正常婦人科各組織および癌組織のパラフィン切片を作製し、免疫組織染色にて染色パターンから幹細胞マーカーの同定の可能性を探った。検討した抗体は、Oct3/4、Nanogなどのembryonic stem cellに発現が見られる因子。SSEA-4、breast cancer resistant protein(BCRP)などの細胞のstemnessに関連があるとされる12の抗体を選択し、それぞれのpositive controlを検索し、至適染色条件を詳細に検討した。
一方、子宮頸ガン由来のHella細胞を利用し、他の癌幹細胞で知られているCD24,CD29,CD44,CD49f,ESAなどの表面抗原を用いて、癌幹細胞の同定を検討した。それぞれの単因子の発現は陽性細胞数の頻度より幹細胞のみならずprogenitor cellsを含んでいる可能性がある。そこで、幹細胞マーカー候補因子を複数発現している細胞においてより幹細胞としての確からしさが増すものと考え、重染色・sortingによる細胞の抽出を試みた。CD24(+)CD44(+)のpopulationにおいて、(1)sphere形成能、(2)soft agar上でのコロニー形成能、(3)細胞増殖能、(4)マウスにおける腫瘍形成能、(5)上記の幹細胞マーカーの発現が他の3つのsub-population ((+)(-),(-)(+),(-)(-))よりも顕著であった。また、CD24(+)CD44(+)をconfluentまで培養すると、その他3つのsub-population((+)(-),(-)(+),(-)(-))が出現してきた。

研究成果

• [雑誌論文] Human Amniotic Mesenchymal Cells Differentiate into Chondrocytes. (2009)
  • 著者名/発表者名: Jun Ping Wei, Masashi Nawata, Shigeyuki Wakitani, Kiyokazu Kametani, Masao Ota, Ayaka Toda, Ikuo Konishi, Souhei Ebara, Toshio Nikaido.
  • 雑誌名: Cloning and Stem Cells 11(1) ページ: 19-26
  • 査読あり
• [雑誌論文] Characterization of laminin isoforms in human amnion. (2008)
  • 著者名/発表者名: Takashima S., Yasuo M., Sanzen N., Sekiguchi K., Okabe M., Yoshida T., Toda A., Nikaido T.
  • 雑誌名: Tissue and Cell 40 ページ: 75-81
  • 査読あり
• [雑誌論文] : Overexpression of RhoA enhances peritoneal dissemination. RhoA suppression with Lovastatin may be useful for ovarian cancer. (2008)
  • 著者名/発表者名: Horiuchi A., Kikuchi N., Osada R., Wang C, Hayashi A., Nikaido T., Konishi I.
  • 雑誌名: Cancer Sci 99 ページ: 2532-2539
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mutation-, Aging-, and Gene Dosage-dependent Accumulation of Neuroserpin (G392E) in Endoplasmic Reticula and Lysosomes of Neurons in Transgenic Mice. (2008)
  • 著者名/発表者名: Takasawa A., Kato I., Takasawa K., Ishii Y., Yoshida T., Shehata M., Kawaguchi H., Mohafez O., Sasahara M., Hiraga K.
  • 雑誌名: Journal of Biological Chemistry 283 ページ: 35606-35613
  • 査読あり
• [雑誌論文] Strom SC. Isolation and Characterization of Cells from Human Term Placenta. (2008)
  • 著者名/発表者名: 1) Parolini O., Alviano F., Bagnara GP., Bilic G., Buhring H-J., Evangelista M., Hennerbichler S., Liu B., Magatti M., Mao N., Miki T., Marongiu F., Nakajima H., Nikaido T., Portmann-Lanz C-B., Sankar V., Soncini M., Stadler G., Surbek D., Takahashi T., Redle H., Sakuragawa N., Wolbank S., Zeisberger S., Zisch A
  • 雑誌名: Outcome of the First International Workshop on Placenta Derived Stem Cells. Stem Cells. 26 ページ: 300-311
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mutation- aging-, and gene-dosage-dependent accumulation of FENIB-type meuroserpin(G392E) in ERs and lysosomes of neurons in transgenic mice. (2008)
  • 著者名/発表者名: Akira Takasawa, Ichiro Kato, Kumi Takasawa, Yoko Ishi, Toshiko Yoshida Mohammad H. Shehata, hiroshi Kawaguchi, 0mar M. M., ohafez, Masakiyo Sasahara, Koichi Hiraga
  • 雑誌名: J Biol Chem 283(51) ページ: 35606-13
  • 査読あり
• [学会発表] 羊膜間葉系幹細胞(HAM)を用いた軟骨細胞分化誘導 (2009)
  • 著者名/発表者名: 野上真紀子, 津野宏彰, 小池千加, 岡部素典, 吉田淑子, 木村友厚, 二階堂敏雄
  • 学会等名: 第8回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20090305-20090306
• [学会発表] マウス羊膜幹細胞の分化能 (2009)
  • 著者名/発表者名: 吉田淑子, Teng Zan, 周 凱旋, 岡部素典, 小池千加, 米田徳子, 野上真紀子, 樋口 収, 二階堂敏雄
  • 学会等名: 第8回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20090305-20090306
• [学会発表] ヒト羊膜間葉系幹細胞の顎骨再生医療への応用についての検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 津野宏彰, 吉田淑子, 野上真紀子, 小池千加, 岡部素典, 能登善弘, 野口 誠, 二階堂敏雄
  • 学会等名: 第8回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20090305-20090306
• [学会発表] 子宮頸癌におけるがん幹細胞の同定 (2009)
  • 著者名/発表者名: Moustafa, Fathy, 小池千加, 吉田淑子, 岡部素典, 二階堂敏雄
  • 学会等名: 第8回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20090305-20090306
• [学会発表] Hyper-dry 乾燥羊膜による緑内障濾過胞からの房水漏出の治療 (2009)
  • 著者名/発表者名: 北川清隆, 林 篤志, 岡部素典, 吉田淑子, 二階堂敏雄
  • 学会等名: 第8回日本再生医療学会総会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20090305-20090306
• [学会発表] Application of Amniotic Membrane. Amnion-Derivea Stem Cells for Regenerative Medicine. (2008)
  • 著者名/発表者名: 二階堂敏雄
  • 学会等名: ベトナム軍医大学医学部大学院
  • 発表場所: ハフイ, ベトナム
  • 年月日: 20081210-20081215
• [学会発表] 好中球、単球、T細胞から産生されるIL-17はTNFαと相乗的に作用し羊膜上皮、間葉系細胞からのIL-8産生を亢進させる。(学会賞) (2008)
  • 著者名/発表者名: 伊藤実香, 中島彰俊, 伊奈志帆美, 岡部素典, 米田哲, 塩崎有宏, 二階堂敏雄, 斎藤滋
  • 学会等名: 第22回日本生殖免疫学会総会学術集会
  • 発表場所: 富山
  • 年月日: 20081206-07
• [学会発表] Application of Amniotic Membrane. -Amnion-Derived Cells for Regenerative Medicine University of Toyama-. (Invited lecture) (2008)
  • 著者名/発表者名: Nikaido T.
  • 学会等名: The 5th Chinese Conference on Oncology
  • 発表場所: 石家庄, 中国.
  • 年月日: 20080919-20080922
• [学会発表] Identification of stem cells from cervical cancer. (2008)
  • 著者名/発表者名: Zhou K.
  • 学会等名: The 5th Chinese Conference on Oncology
  • 発表場所: 石家庄, 中国.
  • 年月日: 20080919-20080922
• [学会発表] IL-17 in the pathogenesis of preterm labor. (NIH/NICHD Travel Award) (2008)
  • 著者名/発表者名: Ito M., Nakashima A., Ina S., Okabe M., Yoneda S., Shiozaki A., Nikaido T., Saito S.
  • 学会等名: American Society for Reproductive Immunology (ASRI)
  • 発表場所: Chicago
  • 年月日: 20080611-20080614
• [学会発表] The Potential of Amniotic Membrane. (Invited lecture) (2008)
  • 著者名/発表者名: Nikaido T.
  • 学会等名: The 2nd Hong Kong International burns & Wound Healing Symposium
  • 発表場所: Hong Kong
  • 年月日: 20080517-20080519
• [学会発表] Amnion-Derived Cells for Regenerative Medicine. (Invited lecture) (2008)
  • 著者名/発表者名: Nikaido T.
  • 学会等名: The 2nd Hong Kong International burns & Wound Healing Symposium
  • 発表場所: Hong Kong
  • 年月日: 20080517-20080519
• [学会発表] Preterm PROMでは羊膜中のalpha 1 antitrypsinが酸化され、その活性が低下している (2008)
  • 著者名/発表者名: 米田徳子, 戸田文香, 米澤理可, 西山玲奈, 伊藤実香, 立松美樹子, 米田 哲, 塩崎有宏, 齋藤 滋, 二階堂敏雄
  • 学会等名: 第60回日本産科婦人科学会総会ならびに字術講演会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20080412-20080415
• [学会発表] ホートファジーにより低酸素下, 低栄養下の絨毛外栄養細胞の浸潤能は亢進する (2008)
  • 著者名/発表者名: 立松美樹子, 中島彰俊, 二階堂敏雄, 齋藤 滋
  • 学会等名: 第60回日本産科婦人科学会総会ならびに学術講演会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20080412-20080415
• [学会発表] 再生医療の現状と展望 (2008)
  • 著者名/発表者名: 二階堂敏雄
  • 学会等名: 富木医療器(株)
  • 発表場所: 富山
  • 年月日: 2008-10-18
• [図書] メティカルドゥ (2008)
  • 著者名/発表者名: 二階堂敏雄, 吉田淑子, 岡部素典, 戸田文香
  • 総ページ数: 7
  • 出版者: 羊膜由来実幹細胞. 「遺伝子医学MOOK別册進みつづける細胞移植治療の実際 上巻」
• [備考]
  • URL: http://www.med.u-toyama.ac.jp/saiseiigaku/index.html
• [産業財産権] 培養重層上皮シートの改良作製方法 (2008)
  • 発明者名: 二階堂敏雄, 岡部素典, 齋藤滋, 倉科憲治, 小池剛史
  • 権利者名: 国立大学法人富山大学, 国立大学法人信州学
  • 産業財産権番号: 特願2008-106448
  • 出願年月日: 2008-04-16
• [産業財産権] ヒト羊膜由来間葉系細胞及びこれを用いた糠尿病治療薬 (2008)
  • 発明者名: 二階堂敏雄, 吉田淑子, 岡部素典, 京 哲, 清野 透
  • 権利者名: 国立大学法人富山大学, 国立大学法人金沢大学, 国立がんセンター
  • 産業財産権番号: 特願2008-213301
  • 出願年月日: 2008-08-21