| 研究概要 |
1.HER-2発現の解析
各種卵巣癌由来培養細胞株におけるHER-2蛋白の過剰発現をWesternblotにより解析した。その結果、発現量によりRMG-1、HTOAを高発現株、田C-2、OVISE、HMOAを中発現株、HTBOA、HNOA、MCAS、HMKOAを低発現株と分類した。HER-2高発現株RMG-1において、免疫組織化学染色によるHER-2蛋白の細胞膜上での発現を見た。
2.プロテオミクスによる細胞内蛋白質の網羅的解析(その(1))
HER-2高発現株RMG-1に対し、抗癌剤Herceptinと分子シャペロンHsp90阻害薬Geldanamycin(GA)を単独投与、または併用投与した際、GAが含まれる単独・併用投与群において蛋白質が増加する蛋白スポットが検出された。
3.プロテオミクスによる細胞内蛋白質の網羅的解析(その(2))
GAにより蛋白質が増加したゲル上の蛋白質スポットを切り出し、In-Gel Digestion処理後、蛋白質断片の質量をLC-MS/MSを用いて決定し、蛋白質のコンピューター解析により当該蛋白質を同定した結果、Heat shock protein(Hsp90,Hsp70,Hsp60)が同定された。
4.MTTassayによる細胞増殖(抗癌剤感受性)の解析
HER-2高発現株闇G-1と中発現株HAC-2にHerceptin/GAを単独投与または併用投与した際の細胞増殖の様子、並びに2種の薬剤による相乗効果が見られるかどうか検討した。その結果、単独投与ではGA投与群に細胞減少効果が著しかった。併用投与した細胞では単独投与よりもさらに細胞数の減少があり、相乗効果が見られた。
|
