| 研究概要 |
1.プロテオミクスにより検出した蛋白質の同定
Geldanamycin投与後の細胞の蛋白質を抽出し、Hsp70蛋白の発現をWestern blotにより解析した。その結果、Geldanamycin添加後に増加したHsp70の発現が確認され、プロテオミクスの結果の同定がされた。
2.HER-2蛋白質分解におけるHsp70の関与
RMG-1細胞にHsp70のRNAiが導入されにくかったため、RNAiを使用した蛋白分解へのHsp70介入の度合の検討ができなかった。
3.GeldanamycinによるHER-2蛋白質分解経路
Proteasome inhibitor(MG132, ZLL, ZLLL)でプロテアソーム分解経路を抑制後、Geldanamycinを添加し、WesternblotによりHsp70の発現を解析した。その結果、inhibitor添加後のHsp70はGeldanamycinを添加しても分解されず、プロテアソームによる分解経路であることが確認された。
4.Geldanamycin投与後のHER-2蛋白質とHsp70の関係の変化
Geldanamycin投与前後のHsp70発現を免疫細胞化学染色で確認した結果、投与後は細胞膜上でHsp70発現が増えることが確認された。
5.Hsp70による抗アポトーシス作用の解析
解析中である。
6.Hsp70inhibitorによる抗アポトーシス作用の解除
解析中である。
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