| 研究課題/領域番号 |
18591998
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
坂本 啓 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助教 (00302886)
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| 研究分担者 |
勝部 憲一 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 講師 (20233760)
山口 朗 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (00142430)
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| キーワード | Zfp64 / Notch / Runx2 / C2C12 / 筋分化 / 骨分化 |
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| 研究概要 |
われわれは骨形成のメカニズムを解明するための研究を推進する過程で、幹細胞分化制御のカギとなる因子である膜蛋白型受容体ノッチ(以下Notch)を介したシグナルに着目し、骨芽細胞の分化にNotchシグナルによる制御が支配的な役割を果たすことを示してきた。その結果、分化段階に応じた多段階的な制御機構や、Notchシグナルを介して骨形成を制御する未知の因子の存在が示唆された。これらの点を解明することを目的として研究を行った。分化段階に応じた多段階的な制御機構は当初のわれわれの予想よりも複雑であり、研究機関内に研究を終了できない可能性が強まったので、研究期間の途中からは未知の因子の同定とその機能解析に集中して研究を行った。われわれはNotchの細胞内ドメインに結合する因子を酵母2-ハイブリッド法で探索し、転写調節因子Zfp64を同定した。Zfp64とNotchとの結合は免疫共沈法等で確認した。われわれはZfp64はNotchの転写活性化作用を増強し、HeylなどのNotchの下流遺伝子の発現を増強することを見出した。われわれはZfp64は間葉系細胞に広く発現していることを示し、骨芽細胞分化に重要な転写因子であるRunx2による発現調節を受けていることを示した。培養細胞(C2C12細胞)を用いた実験から、Zfp64は筋分化を抑制し、骨芽細胞分化を促進する作用があることを示した。われわれの成果はNotchシグナル系とRunx2のシグナルをつなぐ因子の一つを同定し、その機能とその作用機序を示すことによって間葉細胞の分化制御機構の一端を明らかにしたことである。
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