| 研究課題/領域番号 |
18592076
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(C)
|
| 研究機関 | 金沢医科大学 |
|---|
研究代表者 |
田中 卓二 金沢医科大学, 医学部, 教授 (40126743)
|
|---|
| 研究分担者 |
杉江 茂幸 金沢医科大学, 医学部, 教授 (60187648)
甲野 裕之 金沢医科大学, 医学部, 助教授 (20221236)
|
|---|
| キーワード | 癌 / ゲノム / 細胞・組織 / 動物 / 口腔 |
|---|
| 研究概要 |
舌発癌過程におけるDNAmethylationプロファイルを知る目的で、実験を行った。6週齢雄性rasH2マウス5匹に4-NQO(20ppm)を8週間飲水投与し、30週齢で屠殺した。発生した舌腫瘍(乳頭腫4例、扁平上皮癌3例)、高度異形成8例および非病変部舌粘膜5例のmethylationを検索した。実験終了時に得られた舌をホルマリン固定後、パラフィンブロックを作製し、HE染色標本にて病理診断を行い、次いで、作製した10μmパラフィン切片からDNAを抽出した。DNA methylationの解析は、multiplex methylation specific PCR(MSP)法でp14^<ARF>、p16^<INK4a>,Apc、GSTP遣伝子を、conventional MSP法にてcyclin D2遣伝子で行った。その結果、非病変部舌粘膜5例では、Apcで1例にmetllylationをみたが、p14^<ARF>、p16^<INK4a>、GSTP、cyclin D2にはmethylationをみなかった。高度異形成8例では、p14^<ARF>で3例に、p16^<INK4a>で1例に、Apcで3例に、GSTPで1例、eyclin D2で1例にmethylationをみた。乳頭腫4例では、p14^<ARF>で1例に、p16^<INK4a>で1例に、Apcで2例に、GSTP1例にmethylationをみたが、cyclin D2にmethylationはなかった。一方、扁平上皮癌3例では全例に、p14^<ARF>、p16^<INK4a>、Apc、GSTP、cyclin D2のmethylationをみた。以上のごとく、舌発癌過程で異なるmethylationプロファイルが観察され、特にApc、cyclin D2のmethyaltionの頻度が病変の進行に従い増加する傾向が窺えた。しかし、解析病変数が少ないため、さらに検索数を増加して今回の結果を検証する予定である。また、食道腫瘍の発生も多数、観察されたので、同様の解析を実施する予定である。
|
