| 研究課題/領域番号 |
18592208
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| 研究機関 | 松本歯科大学 |
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研究代表者 |
高橋 昌宏 松本歯科大学, 歯学部, 助教 (90340059)
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| 研究分担者 |
上松 隆司 松本歯科大学, 大学院・歯学独立研究科, 准教授 (40203476)
宇田川 信之 松本歯科大学, 歯学部, 教授 (70245801)
山下 照仁 松本歯科大学, 総合歯科医学研究所, 講師 (90302893)
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| キーワード | ドセタキセル / 骨吸収 / 骨芽細胞 / 破骨細胞 / 微小管 |
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| 研究概要 |
本年度はタキサン系抗癌剤ドセタキセル(Taxotere)の腫瘍随伴性骨吸収に対する効果を検討するため、マウス骨芽細胞、破骨細胞を用いて検討した。今回の知見はJBMMに投稿し、現在revice中である。
1.破骨細胞分化シグナルに対するドセタキセルの影響を調べるために、RANKL/RANKシグナルの下流の伝達因子群の発現とリン酸化修飾を調べた。マウス脛骨から採取した骨髄細胞をM-CSF(50ng/ml)存在下、3日間培養して骨髄マクロファージに分化させ、破骨細胞分化シグナルであるI-κBの分解、ERKのリン酸化をウェスタン法で定量化したところ、LPS、パクリタキセルではI-κBの分解とERKのリン酸化を認めたが、ドセタキセル刺激では認めなかった。
2.破骨細胞の骨吸収活性を検討するため、アクチンリングの形成と微小管の動態を抗アクチン抗体や抗微小管抗体を用いて免疫組織学的に観察し、ドセタキセル添加による形態変化を観察した。濃度10^<-7>Mのドセタキセルで骨芽細胞の微小管は著しい形態変化を認めた。また、高濃度10^<-5>Mでは破骨細胞のアクチンリング形成が完全に抑制された。
3.最近、破骨細胞の表層にvesicular glutamate transporter 1(VGLUT1)が存在し、KCl(50mM)刺激でL-グルタミンを放出することが明らかとなった(EMBOJ2006;25:4175-86)。今回の研究では、ドセタキセルによる成熟破骨細胞からのL-グルタミン放出に対する効果を検討した。
1.ドセタキセルは、破骨細胞前駆細胞上のTLR4/MD2を介したシグナル伝達をしない。
2.ドセタキセルは濃度依存的に骨吸収抑制作用したが、破骨細胞のアクチンリング形成も抑制した。
3.ドセタキセルはKCl(50mM)刺激で誘導される破骨細胞のL-グルタミン放出を濃度依存的に抑制した。
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