| 研究分担者 |
高戸 毅 東京大学, 医学部附属病院, 教授 (90171454)
星 和人 東京大学, 医学部附属病院, 寄付講座教員(客員准教授) (30344451)
小笠原 徹 東京大学, 医学部附属病院, 寄付講座教員(助教相当) (20359623)
松崎 雅子 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (80313154)
大橋 克巳 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (60233235)
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| 研究概要 |
本年度は、顎裂部骨欠損修復の効率を上昇させうる新規骨分化促進因子の検索を目的として、主に骨髄由来間葉系細胞および各種株化培養細胞でのNanog発現調節の検討とその骨分化能に対する影響を検討した。まず、ヒト骨髄由来間葉系細胞あるいはマウス未分化間葉系幹細胞株C3H10T1/2、マウス前骨芽細胞株MC3T3-E1に対してBMP-2による骨分化誘導あるいはOsteogenic mediumを用いた培養法による分化誘導を行い、Nanog遺伝子およびNanogタンパクの発現レベルの変化をPCRならびにWestern blottingで経時的に解析したところ、分化誘導の有無に関わらず、これらの細胞においては、遺伝子レベルあるいはタンパクレベルでのNanogの発現は検出出来なかった。そこで骨・軟骨分化とNanogとの関連を検討するため、レトロウイルスベクターを用いてNanogを安定発現する細胞株の作成を行い、マウス未分化間葉系幹細胞株C3H10T1/2、マウス前骨芽細胞株MC3T3-E1を親株としたセルラインを複数樹立することが出来た。現在は、それらのセルラインのCharacterizationのために、各々の細胞におけるNanog発現レベルの変化と、骨・軟骨分化に関わり深いSmadおよびMAPキナーゼ(p38)、あるいは幹細胞の自己複製に重要なstat3のリン酸化や発現変化、骨軟骨分化で重要な機能を果たしているCdk2,4,6などのタンパク発現レベルなどを比較検討しているところである。
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