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2006 年度 実績報告書

歯周疾患活動性マーカーの迅速測定デバイスの開発

研究課題

研究課題/領域番号 18592262
研究種目

基盤研究(C)

研究機関独立行政法人産業技術総合研究所

研究代表者

片岡 正俊  独立行政法人産業技術総合研究所, 健康工学研究センター, 研究チーム長 (20224438)

研究分担者 木戸 淳一  徳島大学, 大学院ヘルスバイオサイエンス研究部, 助教授 (10195315)
キーワード歯周病 / マイクロチップ電気泳動 / 診断デバイス / 疾患活動性 / PICP
研究概要

歯周疾患活動性マーカーとして現在、IL-1β、コラゲナーゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼさらには1型コラーゲンの前駆体である1型プロコラーゲンC末端ペプチド(PICP)が知られている。しかしながら、現状ではこれら活動性マーカーはウェスタンブロット法やELISA法などの免疫学的検出法を中心に研究室レベルでの利用に限られており、Point Of Care Testingに用いることは不可能である。そこで核酸の解析を中心に迅速・正確・省サンプルな解析が可能なマイクロチップ電気泳動をベースにして、これら活動性マーカーをマイクロチップ基板上に作製したマイクロ流路上での検出系の構築を行った。検出対象としてはPICPを用いており、一次抗体をマイクロ流路上に固定後ブロッキング操作を施し、PICPをマイクロ流路に導入しさらにペルオキシダーゼ標識二次抗体を反応させてマイクロ流路でサンドイッチELISA法を行った。流路を十分に洗浄した後、ペルオキシダーゼ基質を加えてペルオキシダーゼ活性をCCDカメラで定量化することでPICP検出の定量性を検討した。その結果、PICP 10〜600 ng/mlの範囲で十分な定量性が確認された。 PICPの基準値としては160ng/mlであり、この点からも今回マイクロチップ基板での測定範囲は十分な濃度と考えられる。さらに今回我々が構築したマイクロ流路での検出系は、抗原を流路に導入後わずか30分で結果が得られている。これは通常のELISA法が1時間以上であるのに比べ、検出時間の大幅な短縮が可能となっており、今後はこれらの方法を基礎として他のマーカー検出法の構築について検討を行う。

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2006 その他

すべて 雑誌論文 (3件)

  • [雑誌論文] Norepinephrine stimulates calprotectin expression in human monocyticcells2006

    • 著者名/発表者名
      Suryono
    • 雑誌名

      J Periodontal Res 41・3

      ページ: 159-164

  • [雑誌論文] High turnover osteoporosis is induced by cyclosporin A in rats2006

    • 著者名/発表者名
      Chic Wada
    • 雑誌名

      J Bone Miner Metab 24・3

      ページ: 199-205

  • [雑誌論文] Determination of human blood glucose lebels using microchip electrophoresis

    • 著者名/発表者名
      Eiki Maeda
    • 雑誌名

      Electrophoresis (in press)

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公開日: 2008-05-08   更新日: 2016-04-21  

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