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2007 年度 実績報告書

蛋白相互作用モジュールの組み換えによる分子進化の再構成の試み

研究課題

研究課題/領域番号 18659076
研究機関東京医科歯科大学

研究代表者

畑 裕  東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (80313237)

キーワード蛋白質 / 相互作用
研究概要

生命の基本単位である細胞は、蛋白、脂質、糖質、核酸から構成されるが、中でも蛋白同士の相互作用は細胞の構造の大枠を決定する点で重要である。ほとんどの蛋白分子は、蛋白相互作用に関わるモジュールをもち、その組み合わせを利用して、多彩な蛋白相互作用を実現している。本研究では1)人為的な蛋白相互作用モジュールを組み合わせて、実際に自然界に存在するよりも、より強固な蛋白相互作用を実現できるかどうか、2)より強固な蛋白相互作用をもつ蛋白分子を、細胞レベルで淘汰選択することが可能かを、明らかにしようとしている。平成18年度には、蛋白相互作用を反映して分泌型ルシフェラーゼをレポーターとして発現すると同時に、分泌型アルカリホスファターゼを内在性のレファレンスとして発現する1体型のレポーターベクターを作成した。また、当初計画によるWWドメインを対象とする試験を行ったが、十分な相互作用を実現できなかった。そこで、平成19年度には対象を変更し、DNA活性化領域に融合した低分子量G蛋白RhoAと、DNA結合領域に融合したRhoA標的蛋白Rhothekinを同時発現する1体型ベクターを作成した。このRhoA/Rhotekinベクターとレポーターベクターを共発現し、RhoAをリポ多糖によって細胞外から活性化させて、RhoA-Rhotekinの相互作用が成立する条件をつくりだし、実際にレポーターのシグナルが増強されるかの検討に着手した。ところがこれまで期待するような十分な応答が得られていない。平成20年度は最終年度にあたるので、細胞系や刺激方法を変えて試行を継続する。

  • 研究成果

    (7件)

すべて 2007

すべて 雑誌論文 (4件) (うち査読あり 4件) 学会発表 (3件)

  • [雑誌論文] S-SCAMalpha is a scaffold to mediate NMDA receptor-dependent RhoA activation in dendrites2007

    • 著者名/発表者名
      Iida J, et. al.
    • 雑誌名

      Molecular Cellular Biology 27

      ページ: 4388-4405

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Ras-association domain family protein 6 induces apoptosis via both caspase-dependent and caspase-independent pathways.2007

    • 著者名/発表者名
      Ikeda M, et. al.
    • 雑誌名

      Experimental Research 313

      ページ: 1484-1495

    • 査読あり
  • [雑誌論文] S-SCAM/MAGI-2 is associated with cell adhesion molecules at inhibitory synapses at rat hippocampal neurons.2007

    • 著者名/発表者名
      Sumita K, et. al.
    • 雑誌名

      Journal of Neurochemistry 100

      ページ: 154-166

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Monoclonal antibody 7F9 recognizes rat protein homologous to human carboxypeptidase-Min rat developing and adult lung.2007

    • 著者名/発表者名
      Fujiwara N, et. al.
    • 雑誌名

      Respirology 12

      ページ: 54-62

    • 査読あり
  • [学会発表] RASSF3による細胞死誘導の解析2007

    • 著者名/発表者名
      大掛 真太郎, 他
    • 学会等名
      第30回日本分子生物学会年会、第80回日本生化学会大会
    • 発表場所
      横浜
    • 年月日
      20071912-14
  • [学会発表] RASSF6とMammalian Sterile 20-like kinase (MST)2の相互作用とその機能の解析2007

    • 著者名/発表者名
      川田 現, 他
    • 学会等名
      第30回日本分子生物学会年会、第80回日本生化学会大会
    • 発表場所
      横浜
    • 年月日
      2007-12-14
  • [学会発表] MST2とMOB1によるNuclear Dbf2-related kinase 1の活性化機構とその生理的意義の検討2007

    • 著者名/発表者名
      日高 志穂, 他
    • 学会等名
      第30回日本分子生物学会年会、第80回日本生化学会大会
    • 発表場所
      横浜
    • 年月日
      2007-12-14

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公開日: 2010-02-04   更新日: 2016-04-21  

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