臓器障害におけるシトルリン化分子の網羅的同定と応用

2006 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18659164
• 研究機関: (財)東京都高齢者研究・福祉振興財団
• 研究代表者: 丸山 直記 (財)東京都高齢者研究・福祉振興財団, 東京都老人総合研究所, 副所長 (00115940)
• キーワード: シトルリン化分子 / PAD / 酸化ストレス / レチノイン酸 / 神経細胞

研究概要

培養神経細胞SH-SY5を用いて6-ヒドロキシドーパミンによる酸化ストレスがカルシウム存在下でPeptydilarginedeiminase(PAD)を活性化し、シトルリン化を生ずることを証明した。現在、このシトルリン化された分子の同定をプロテオーム解析および質量分析機による解析を行っている。
レチノイン酸処理によりSH-SY5にはPADの発現が亢進することがわかった。しかし酸化ストレスによってはPAD発現が亢進しないことが明らかとなった。また初代培養神経細胞においても同様の治験が得られており、アルツハイマー病脳に於けるシトルリン化分子の増加を説明できる現象と考えられる。ヒトPADを遺伝子組み換え技術により作製した。その組み替え蛋白質の活性はin vitroで種々の分子をシトルリン化することを確認している。これらの組み替え蛋白を用いてヒトの各サブタイプに対する抗体を作製して血中レベルでの測定系を開発している。現在、収集している健常者と多様な患者血清中のPADの定量化を行う予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Induction of myasthenia by immunization against muscle-specific kinase (2006)
  • 著者名/発表者名: Shigemoto K等
  • 雑誌名: Journal of Clinical Investigation 116 ページ: 1016
• [雑誌論文] SMP30 functions as gluconolactonase in L-Ascorbic acid biosynthesis and its knockout mice are prone to scurvy. (2006)
  • 著者名/発表者名: Kondo Y等
  • 雑誌名: Proc Natl Acad Sci, USA 103 ページ: 5723
• [雑誌論文] The redox-sensitive DNA binding sites responsible for the age-related down-regulation of SMP30 by the ERK pathway and its reversal by calorie restriction (2006)
  • 著者名/発表者名: Jung KJ等
  • 雑誌名: Antioxidants and Redox Signaling 8 ページ: 671
• [雑誌論文] The increased protein oxidation and the altered expression of Ca^<2+> regulatory proteins in senescence marker protein 30 deficient brain. (2006)
  • 著者名/発表者名: Son TG等
  • 雑誌名: Mech Ageing Dev 127 ページ: 451
• [雑誌論文] 老化と腎-免疫機能 (2006)
  • 著者名/発表者名: 湯村和子他
  • 雑誌名: 腎と透析
• [雑誌論文] A Selective NFkappaB Inhibitor, DHMEQ, Reduced Atherosclerosis in ApoE-deficient mice. (2006)
  • 著者名/発表者名: Chiba T 等
  • 雑誌名: J Atheroscler Thromb 132 ページ: 308