マイクロRNAプロファイリングを用いた酸化ストレス応答の網羅的解析

2006 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18659198
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 熊谷 俊一 神戸大学, 医学系研究科, 教授 (00153346)
• 研究分担者: 河野 誠司 神戸大学, 医学部附属病院, 講師 (20351512)
• キーワード: 酸化ストレス / マイクロRNA / SS-A

研究概要

マイクロRNA(miRNA)は近年発見されたメッセンジャーRNA(mRNA)から蛋白への翻訳を制御する重要な分子である。しかし酸化ストレスに関するmiRNAの研究はまだ見られない。よって、本研究では、酸化ストレスの病態における新たなRNA干渉因子(miRNA)の関与を明らかにし、miRNAによる酸化ストレスの新たな診断法の開発およびRNA干渉を用いた治療法の可能性を明らかにする。具体的に本研究では、1.酸化ストレスに対するmiRNAの発現プロファイルを解析し、過酸化水素やUVBによる酸化ストレスに特異的なmiRNAを同定すること。2.siRNA法などを用いて、1.で同定されたmiRNAの発現量を調節し、これらのmiRNAにより制御を受ける下流分子を同定し、また我々の確立した酸化ストレスモデルであるSS-A/Ro52の酸化ストレスによる細胞内局在変化に関与するmiRNAを同定すること、である。
本年度の研究実施計画は(1)各種酸化ストレス下でのmiRNAの発現のプロファイリング、(2)プロファイリングに基づく、標的mRNA・タンパク質の定量、(3)抗酸化剤NAC(N-アセチルシステイン)などによるmiRNAプロファイリング、(4)in situハイブリダイゼーション法による組織染色であった。
(1)については、157種類のmicroRNAの発現量をTaq-man法で定量し、HSG細胞に各種酸化ストレスを加えて酸化ストレス下でmiRNAの発現のプロファイリングを行った。有意にダウンまたはアップレギュレーションされてるmiRNAを同定し、細胞株・組織を超えて同じ傾向が見られるか確認中である。
すべての経費は上記の研究に必要な試薬費にあてた。

研究成果

• [雑誌論文] Is SS-A/Ro52 a Hydrogen Peroxide-Sensitive Signaling Molecule? (2007)
  • 著者名/発表者名: Nobuhara Y, Kawano S, Kageyama G, Sugiyama D, Saegusa J, Kumagai S
  • 雑誌名: Antioxid Redox Signal 9 (in press)
• [雑誌論文] Thioredoxin protects against joint destruction in a murine arthritis model. (2006)
  • 著者名/発表者名: Tsuji G, Koshiba M, Nakamura H, Kosaka H, Hatachi S, Kurimoto C, Kurosaka M, Hayashi Y, Yodoi J, Kumagai S
  • 雑誌名: Free Radical Biology Medicine 40 ページ: 1721-1731
• [雑誌論文] Trichostatin A cooperates with Fas-mediated signal to induce apoptosis in rheumatoid arthritis synovial fibroblasts. (2006)
  • 著者名/発表者名: Morinobu A, Wang B, Liu J, Yoshiya S, Kurosaka M, Kumagai S
  • 雑誌名: J Rheumatol 33 ページ: 1052-1060
• [雑誌論文] Glutathione S-transferase gene polymorphisms in Japanese patients with rheumatoid arthritis. (2006)
  • 著者名/発表者名: Morinobu S, Morinobu A, Kanagawa S, Hayashi N, Nishimura K, Kumagai S
  • 雑誌名: Clin Exp Rheumatol 24 ページ: 268-273
• [雑誌論文] Performance Evaluation and Cross-reactivity from Insulin Analogs with ARCHITECT Insulin Assay. (2006)
  • 著者名/発表者名: Moriyama M, Hayashi N, Ohyabu C, Mukai M, Kawano S, Kumagai S
  • 雑誌名: Clin Chem 52 ページ: 1423-1426
• [雑誌論文] Troglitazone inhibits cell growth and induces apoptosis of B-ALL cells with t(14;18). (2006)
  • 著者名/発表者名: Takenokuchi M, Saigo K, Nakamachi Y, Kawano S, Hashimoto M, Fujioka T, Koizumi T, Tatsumi E, Kumagai S
  • 雑誌名: Acta Haematol 116 ページ: 30-40
• [図書] Oxidative stress and autoimmune diseases. (In : Singh KK editor) (Oxidative stress, disease and cancer) (2006)
  • 著者名/発表者名: Saegusa J, Kawano S, Kumagai S
  • 総ページ数: 16
  • 出版者: Imperial college press, London