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2007 年度 実績報告書

ステロイドホルモン誘導性non-coding RNAの生理機能と発現調節機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 18659274
研究機関九州大学

研究代表者

高柳 涼一  九州大学, 大学院・医学研究院, 教授 (30154917)

研究分担者 大中 佳三  九州大学, 大学院・医学研究院, 講師 (30325518)
河手 久弥  九州大学, 大学病院, 助教 (20336027)
キーワードグルココルチコイド / 受容体 / ステロイド / non-coding RNA / 遺伝子発現調節 / エストロゲン / アンドロゲン
研究概要

DNAから転写されるRNAは蛋白をコードするmRNAばかりでなく蛋白をコードしないゲノム領域からも転写される(転写産物はnon-codingRNAと呼ばれる)。ステロイドホルモンによる転写調節において未知のnon-coding RNAがホルモン調節系に関与している可能性がある。このような最近のRNA worldに関する新知見を背景に本研究は(1)ステロイドホルモン応答性のnon-coding RNAをcloningする、(2)そのpromoterのホルモン応答性を解析する、(3)機能を解析する、ことを目的として、本年度はステロイドホルモン応答性のnon-coding RNAの候補cloneの解析を行った。
昨年に引き続き、non-coding RNAのcloningを従来のsubtraction hybridization cloning法により行った。乳腺由来細胞(MCF7)と前立腺由来細胞(LNCaP)をグルココルチコイド、エストラジオールまたはジヒドロテストステロン(10-7M)で処理し、そのtotal RNA由来のcDNA群からステロイドホルモン処理をしていないtotal RNA由来のcDNA群をPCR Selectを用いて8〜20倍のレベルで除きcloningした。得られた全cloneの部分sequencingを行い、マウスゲノムデータベースを参考対象として、蛋白をcodeするものを除いた。Non-coding RNAの塩基配列から定量RT-PCR装置により、発現レベルで5倍以上のステロイドホルモン応答性を示すcloneについてfull-lengthcDNAをcloningした。これまでの検討から、偽陽性cloneがかなり多いことが判明したが、いくつかの候補cloneを得ることができたので、これらのcloneの機能及びpromoter領域のcloning、転写調節機構の解析を進めている。

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2007

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件)

  • [雑誌論文] Relationship between Gilbert syndrome and prevalence of vascular complications inpatients with diabetes2007

    • 著者名/発表者名
      Inoguchi T., et. al.
    • 雑誌名

      JAMA 298

      ページ: 1398-1400

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Mutual transactivational repression of Runx2 and the androgen receptor by an impairment of their normal compartmentalization2007

    • 著者名/発表者名
      Kawate H., et. al.
    • 雑誌名

      J Steroid Biochem Mol Biol. 105

      ページ: 46-56

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Identification and synergism of cis-acting elements essential for basal promoter activity of the human type 1 angiotensin II receptorgene in PLC-PRF-5 cells2007

    • 著者名/発表者名
      Shimoda S., et. al.
    • 雑誌名

      Endocr J 54

      ページ: 413-424

    • 査読あり

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公開日: 2010-02-04   更新日: 2016-04-21  

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