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肝臓移植後の拒絶機構には、レシピエントのT細胞が移植肝臓内のドナー由来抗原提示細胞から主要組織適合性抗原(MHC)を直接認識する経路とレシピエント自身の抗原提示細胞から移植肝臓内由来のドナー抗原を間接認識する経路がある。移植抗原に対する免疫寛容の誘導には、それぞれの経路で抗原提示されるT細胞を制御しなければならない。我々は、マウス肝類洞内皮細胞によって抗原提示された異系T細胞は死滅あるいは麻痺に陥り、移植抗原特異的免疫寛容が誘導される可能性を確認した。すなわち同種異系肝臓移植の場合、直接経路で抗原認識するT細胞は寛容化され易く、間接経路で抗原認識するT細胞の活性化が拒絶反応に少なからず関与するものと考えられた。本年度の研究では、肝臓移植の際に摘出されたレシピエントの肝臓から類洞内皮細胞を分離し、ドナー由来の抗原提示機能を誘導した後に、移植肝臓に門脈内注入することで、両経路で抗原認識するT細胞を共に寛容化する可能性をマウスモデルで検討した。
まず、pore membraneにBalb/cマウス由来類洞内皮細胞を接着培養し、肝類洞内皮の解剖構築を模倣したin vitro解析系を確立した。Balb/cマウ系由来類洞内皮細胞は、放射線照射したB6脾細胞であらかじめパルスした。Balb/cマウスのT細胞がpore membraneを通過した後にリンパ球混合試験を行ったところ、間接経路で認識するT細胞は特異的に寛容化した。さらにMHC-class II-deficient B6マウスの細胞膜を貪食したBalb/cマウスの肝類洞内皮細胞をBalb/cに門脈内投与し、1週間後にMHC-class II-deficient B6マウスの心臓を異所性に移植した結果、生着期間は有意に延長された。以上より、ドナー由来のペプチド抗原を表出した宿主由来の肝類洞内皮細胞を門脈内移入することで、ドナー抗原に間接認識経路で応答するT細胞を低反応化あるいは寛容化できる可能性が確認された。
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