リアルタイムin vivoイメージングシステムを用いた婦人科癌薬剤耐性機構の解析

2006 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18659480
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 高野 忠夫 東北大学, 大学病院, 講師 (40282058)
• 研究分担者: 新倉 仁 東北大学, 大学病院, 講師 (80261634) ; 吉永 浩介 東北大学, 大学病院, 助手 (40343058) ; 永瀬 智 東北大学, 大学病院, 助手 (00292326) ; 伊藤 潔 東北大学, 大学院医学系研究科, 助教授 (70241594) ; 八重樫 伸生 東北大学, 大学院医学系研究科, 教授 (00241597)
• キーワード: 薬剤耐性 / 婦人科癌 / Hrs / ATP7B / シスプラチン

研究概要

細胞の小胞輸送機構が重金属のトランスポーター機能と関連すると考え、小胞輸送分子であるHrsを中心に解析を行った。まずシスプラチン耐性の婦人科癌細胞株におけるHrsの発現をRT-PCR、ウエスタン・プロッティング等でスクリーニングした。またHrsに対するsiRNA配列を決定し、レトロウイルスベクターに乗せ変えたsiRNA発現ベクターを作成し、Hrsを発現するシスプラチン耐性癌細胞株に感染させてHrsの発現抑制細胞を作成した。HeLa細胞(子宮頚癌由来)において、Hrsを安定的に発現抑制する株とコントロール細胞株を複数樹立した。それらの細胞でコロニー形成能・免疫不全マウスでの造腫瘍能・転移能を比較したところ、いずれもHrs発現抑制細胞で増殖能や転移能が著明に減弱していた。Hrsの発現抑制により増殖抑制性の分子が蓄積すると考えスクリーニングしたところ、Hrs発現抑制細胞ではE-cadherinが著明に細胞内に蓄積していることを発見した。これに伴いβ-cateninの細胞内局在が変化し、β-cateninシグナルが弱まる事を見出した。Hrsのノックアウトマウスは初期に胎生致死となるので、Hrsの生体内での機能の詳細は不明である。しかしin vitroの実験ではHrsがモノユビキチン化されたタンパク質を認識して小胞輸送し、ライソソームで分解するという機能が明らかになっている。今回Hrsが癌の悪性形質にE-cadherinの輸送と分解を介して関わることが明らかとなったが、来年度はATP7Bの機能解析と同時に、ATP7Bを通して薬剤耐性と小胞輸送の関わりも明らかにする研究計画を策定中である。

研究成果

• [雑誌論文] Phase I trial of concurrent chemoradiation with weekly nedaplatin in patients with squamous cell carcinoma of the uterine cervix. (2007)
  • 著者名/発表者名: Yoshinaga K, Niikura H, Ogawa Y, Nemoto K, Nagase S, Takano T et al.
  • 雑誌名: Gynecologic Oncology 104 ページ: 36-40
• [雑誌論文] Vaginal tumors with histological and immunocytochemical feature of GIST : two cases and review of the literature (2007)
  • 著者名/発表者名: Nagase S, Mikami Y, Moriya T, Niikura H, Yoshinaga K, Takano T et al.
  • 雑誌名: Int J Gynecol Cancer (in press)
• [雑誌論文] Estrogen-producing epithelial cancer of the ovary. (2007)
  • 著者名/発表者名: Tokunaga T, Akahira J, Suzuki T, Kakuta Y, Niikura H, Moriya T, Sasano H, Takano T et al.
  • 雑誌名: Pathol Int (in press)
• [雑誌論文] Lactation and risk of endometrial cancer in Japan : A case-control study. (2006)
  • 著者名/発表者名: Okamura C, Tsubono Y, Ito K, Niikura H, Takano T et al.
  • 雑誌名: Tohoku J Exp Med 208 ページ: 109-115
• [雑誌論文] Paget's disease of the vulva : Clinicopathologic study of type 1 cases treated at a single institution. (2006)
  • 著者名/発表者名: Niikura H, Yoshida H, Ito K, Takano T et al.
  • 雑誌名: Int J Gynecol Cancer 16 ページ: 1212-1215
• [雑誌論文] Clear cell carcinoma of the ovary : a retrospective multicentre experience of 254 patients with complete surgical staging. (2006)
  • 著者名/発表者名: Takano M, Kikuchi Y, Yaegashi N et al.
  • 雑誌名: Br J Cancer 94 ページ: 1369-1374
• [雑誌論文] Clinical outcome and risk factors for recurrence in borderline ovarian tumours. (2006)
  • 著者名/発表者名: Yokoyama Y, Moriya T, Takano T et al.
  • 雑誌名: Br J Cancer 94 ページ: 1586-1591
• [雑誌論文] Adjuvant chemotherapy with irinotecan hydrochloride and cisplatin for clear cell carcinoma of the ovary. (2006)
  • 著者名/発表者名: Takano M, Kikuchi Y, Yaegashi N et al.
  • 雑誌名: Oncology Report 16 ページ: 1301-1306