| 研究概要 |
前駆細胞に癌遺伝子K-rasの変異が入ったモデルとして、不死化ラット子宮内膜細胞(RENT4)に活性型K-ras遺伝子を導入したRK12V細胞を樹立した。
この細胞にはHoechst33342の取り込みの低いside-population(SP)細胞が存在していた。
SP細胞とnon-SP細胞をFACSで単離し培養した。再度、Hoechst33342で染色し解析したところ、SP細胞はSPとnonSPの2つの分画を示したのに対しnon-SP細胞はnon-SP分画のみであった。
このことより、SP細胞は不均等分裂の性質をもつことが示された。
また、SP細胞は、散在性に増殖し、腺管様構造をとりながら増殖するnon-SP細胞に比べ分化マーカー(CD9,CD13)の発現が低下していた。
軟寒天培地上のコロニー形成能に有意差は認めなかったが、SP細胞、non-SP細胞をヌードマウスに接種したところ、SP細胞はnon-SP細胞に比べ有意に大きな周囲組織に浸潤性の腫瘍を形成した。ヘマトキシレン・エオジン染色をすると、non-SP細胞由来の腫瘍は腫瘍細胞が主体であったのに対し、SP細胞由来の腫瘍は腫瘍細胞の他に、間質や細胞外基質が豊富な多彩な組織構造を示した。
マイクロアレイで解析したところ、SP細胞は腫瘍間質形成に関与する遺伝子の発現が亢進していた。
以上より、RK12V細胞のSP細胞は不均等分裂、造腫瘍能の亢進、多分化能を示し、stem-like cellの性質をもつことが示唆された。
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