酸素性網膜症動物モデル作成方法の確立 BL6マウスの母親と新生児を、生後7日目から5日間高濃度酸素分圧(80%)に暴露することで、網膜の無灌流領域を作成できることを確認した。この観察のためにFITCデキストランを心腔内に注射しで、網膜を含む全身に循環させ蛍光顕微鏡で観察することで、網膜の血管並びに無灌流領域の形成を観察できる手技を確立した。さらに、高濃度酸素に暴露後、1ないし2週間正常酸素分圧で飼育することにより網膜血管新生が生じること。その後1ヶ月程度正常酸素加で飼育すると、無灌流領域に正常毛細血管様の血管が伸展する場合があることを観察した。 プロテオミクスの手技の確立 現在プロテオミクスの手技の確立のために、マウス新生児の網膜よりも総蛋白量が多い、ラットの網膜を用いて、プロテオミクスの手技の確立を目指している。刺激としては、ラットにストレプトゾトシンを投与ずることで糖尿病にすること。もしくな、インドシアニングリーンを硝子体腔に注射することで、網膜における蛋白質の発現変化を誘導してプロテオミクスを行っている。現在糖尿病の網膜では2次元電気泳動で最低1つの変化が認められ、質量分析計で測定した結果としては、glial fibrillary acidic proteinである可能性が示唆されている。 ICGを硝子体注射した網膜においては、現在2次元電気泳動で変化があると思われるスポットが4つみつかっており、これらの物質を今後質量分析計で検討する予定である。 また、本来の実験である酸素性網膜症に関しては、現在、いろいろな段階での網膜を凍結保存しており、手技が確立したら、プロテオミクスにより蛋白の発現変化をみていく予定である。
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