宿主遺伝子産物によるレンチウイルス複製制御の新たな分子メカニズム解析に関する研究

2007 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18689014
• 研究機関: 国立感染症研究所
• 研究代表者: 駒野 淳 国立感染症研究所, エイズ研究センター, 主任研究官 (60356251)
• キーワード: ウイルス / 生体分子 / 感染症

研究概要

本年度の研究により新たにCyclin K,HHDj1/HSP40B6/DNAJB6,Brd4ほか数個の遺伝子をレンチウイルス複製に関与する宿主因子として同定した。
複製初期過程:ウイルスレセプターCXCR4が従来考えられてきた2量体ではなく3量体以上の複合体を形成している事が世界最先端のlive cell assayであるBRET/BiFC法により証明された。ヒトPBL由来cDNAライブラリーからCXCR4の発現を阻害する因子としてPLC delta 1が候補として同定された。
複製後期過程:P-TEFb構成要素の一つであるcyclin KがHIV-1とSIVの複製を特異的に抑制する事を証明した。これはウイルス複製に必須であるTatが転写を増強する際に必要なCyclin T1/CDK9複合体に対し,Cyclin KがT1とCDK9を競合してCyclin T1/CDK9複合体数を減少させることによりTat機能を妨げるためと考えられた。Cyclin Kの発現・機能増強がエイズ治療に結びづく可能性が考えられる
(Urano et al.,AIDS,2008)。ウイルス複製阻害因子として転写因子Brd4のC末端ドメインが同定された。これはTat-Cyclin Tl結合をアロステリックに阻害するためと考えられる。一方,Arp2/3複合体のArp2とArp3はHIV-1 Gagと相互作用してウイルス産生を促進していることが明らかとなった。
動物種特異的レンチウイルス複製抑制因子:ウサギ細胞由来RK13細胞cDNAライブラリーからのウイルス感染抵抗遺伝子選択によりウサギ細胞におけるHIV-1感染抵抗性に関与する可能性がある遺伝子群がいくつか同定された。そのうち,HHDj1/HSP40/DNAJB6はウイルス産生を抑制する宿主因子である事が判明した。

研究成果

• [雑誌論文] Cyclin K/CPR4 inhibits primate lentiviral replication by inactivating Tat/P-TEFb-dependent LTR transcription (2008)
  • 著者名/発表者名: Emiko Urano, Saki Shimizu, Yuko Futahashi, Makiko Hamatake, Yuko Morikawa, Naoko Takahashi, Hidesuke Fukazawa, Naoki Yamamoto, *.Jun Komano.
  • 雑誌名: AIDS 22 ページ: 1081-1089
  • 査読あり
• [雑誌論文] SOCSl is aninducible host factor during HN-1 infection and regulates the intracellular trafficking and stability of HN-1 Gag (2008)
  • 著者名/発表者名: Akihide Ryo, Naomi Tsurutani, Kenji Ohba, Ryuichiro Kimura, Jun Komano, Mayuko Nishi, Hiromi Soedal, Shinichiro Hattori, Kilian Perrem, Mikio Yamamoto, Joh Chiba, Jun-ichi Mimaya, Kazuhisa Yoshimura, Shuzo Matsushita, Mitsuo Honda, Akihiko Yoshimura, Ichiro Aoki, Yuko Morikawa and Naoki Yamamoto
  • 雑誌名: Proc Natl Acad SciU S A 105(1) ページ: 297-299
  • 査読あり
• [雑誌論文] CD63 and its mutants disrupt CXCR4 trafficking to the plasma membrane and inhibit T-cell tropic HIV-1 entry (2008)
  • 著者名/発表者名: Takeshi Yoshida, Yuji Kawano, Kei Sato, Yoshiharu Miura, Yoshinori Ando, Jun Aoki, Jun Komano, Yuetsu Tanaka, Yoshio Koyanagi.
  • 雑誌名: Traffic 9(4) ページ: 540-558
  • 査読あり
• [雑誌論文] Separate elements are required for ligand-dependent and-independent internalization of metastatic potentiator CXCR4 (2007)
  • 著者名/発表者名: Futahashi Y, Komano J, Urano E, Aoki T, Hamatake M, Miyauchi K, Yoshida T, Koyanagi Y, Matsuda Z, Yamamoto N.
  • 雑誌名: Cancer Sci 98(3) ページ: 373-9
• [雑誌論文] In vitro translation to study HIV protease activity (2007)
  • 著者名/発表者名: Matsuda Z, Iga M, Miyauchi K, Komano J, Morishita K, Okayama A, Tsubouchi H.
  • 雑誌名: Methods Mol Bio 375 ページ: 135-149
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of the suppressive factors for human immunodeficiencyvirustype-1 replication using the siRNA mini-library directed against host cellular genes (2007)
  • 著者名/発表者名: Kameoka M, Kitagawa Y, Utachee P, Jinnopat P, Dhepakson P, Isarangkura-na-ayuthaya P, Tokunaga K, Sato H, Komano J, Yamamoto N, Oguchi S, Natori Y, Ikuta K.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 359(3) ページ: 729-734
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibiting lentiviral replication by HEXIM1,a cellular negative regulatoro the CDK9/cyclin T complex (2007)
  • 著者名/発表者名: Shimizu S, Urano E, Futahashi Y, Miyauchi K, Isogai M, Matsuda Z, Nohtomi K, Onogi T, Takebe Y, Yamamoto N, Komano J.
  • 雑誌名: AIDS 21(5) ページ: 575-582
  • 査読あり
• [雑誌論文] ARVのUniversal Access時代を迎えて;エイス研究センターの国際研修活動について (2007)
  • 著者名/発表者名: 村上 努、駒野 淳
  • 雑誌名: 病原微生物検出情報lnfectious Agents Surveillance Report(IASR) 28(6) ページ: 164-166
• [雑誌論文] Regulation of Gag trafficiking and functions(Review) (2007)
  • 著者名/発表者名: Murakami T, Gottlinger H, Morikawa Y, Komano J, Ryo A, Sato H.
  • 雑誌名: The Journal of AIDS Research 9(2) ページ: 102-107
• [学会発表] Biophysical analysis of homotypic interaction facets that mediate the clustering of the G-protein-coupled receptor CXCR4 in the absence of SDF-lalpha (2007)
  • 著者名/発表者名: 浜武 牧子、二橋 悠子、青木 徹、山本 直樹、駒野 淳
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会年会・第80回日本生化学会大会合同 大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20071211-15
• [学会発表] Co-chaperoneタンパク質DNA J/HSP40 familyによるHIV-1複製抑制 (2007)
  • 著者名/発表者名: 浦野 恵美子、奥長 造之、森川 裕子、駒野 淳
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会年会・第80回日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20071211-15
• [学会発表] 非ミリストイル化Gagを用いたレトロウイルスGagのVps輸送経路を通過することによる影響およびそのウイルス学的意義 (2007)
  • 著者名/発表者名: Toru Aoki, Saki Shimizu, Emiko Urano, Yuko Futahashi, Makiko Hamatake, Hirokazu Tamamura, Kazuo Terashima, Tsutomu Murakami, Raoki Yamamotoand Jun Romano
  • 学会等名: 第30回日本分子生物学会年会・第80園日本生化学会大会合同大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20071211-15
• [学会発表] Gagタンパク質の形質膜輸単シグナルがミリストイル化であることのウイルス学的意義について (2007)
  • 著者名/発表者名: Toru Aoki, Saki Shimizu, Emiko Urano, Yuko Futahashi, Makiko Hamatake, Hirokazu Tamamura, Kazuo Terashima, Tsutomu Murakami, Naoki Yamamoto and Jun Komamo
  • 学会等名: 第21回日本エイズ学会学術集会
  • 発表場所: 広島
  • 年月日: 20071128-30
• [学会発表] Cyclin K/CPR4によるHIV-1複製抑制とそのメカニズムの解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: Emiko Urano, Saki Shimizu, Makiko Hamatake, Yuko Morikawa, Naoki Takahashi, Hidesuke Fukazawa, Naoki Yamamoto, and Jun Komano
  • 学会等名: 第55回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 20071021-23
• [学会発表] Characterization of neutralizing antibodies purified from Japanese LTNP hemoplliliacs (2007)
  • 著者名/発表者名: Jun Komano
  • 学会等名: US-Japan Cooperative Medical Science Program 20th Joint Meeting of AIDS Panels
  • 発表場所: Monterey, CA, USA
  • 年月日: 20070913-14
• [学会発表] Upregulating expression of cyclin K/CPR4 limits the replication of HIV-1 (2007)
  • 著者名/発表者名: Emiko Urano, Saki Shimizu, Makiko Hamatake, Yuko Morikawa, Naoki Yamamoto, and Jun Komano
  • 学会等名: CSH Meeting on Retroviruses
  • 発表場所: Cold Spring Harbor, NY, USA
  • 年月日: 20070522-27
• [学会発表] CD63 AND ITS MUTANTS INHIBIT FUSION OF CXCR4-CONTAINING VESICLES TO THE PLASMA MEMBRANE AND BLOCK X4HIV-IENTRY (2007)
  • 著者名/発表者名: Takeshi Yoshida, Yuji Bawano, Yoshinori Ando, Kei Sato, Jun Komano, Yoshiharu Miura, Yuetsu Tanaka and Yoshio Royanagi
  • 学会等名: CSH Meeting on Retroviruses
  • 発表場所: Cold Spring Harbor, NY, USA
  • 年月日: 20070522-27
• [学会発表] Rerouting the plasma membrane targeting of HIV-1 and MLV gag by replacing myristoylation signal with membrane proteins (2007)
  • 著者名/発表者名: Toru Aoki, Saki Shimiz, Urano Emiko, Yuko Futahashi, Makiko Hamatake, Kazuo Terashima, Tsutomu Murakami, Naoki Yamamoto, and Jun Komano
  • 学会等名: CSH Meeting on Retroviruses
  • 発表場所: Cold Spring Harbor, NY, USA
  • 年月日: 20070522-27
• [学会発表] Analysis of interaction between HIV-1 Gag and tip47 and its associated proteins (2007)
  • 著者名/発表者名: Kei Miyagawa, Tsutomu Murakami, Yuki Ohsaki, Jun Romano, Toyoshi Fujimto and Naoki Yamamoto
  • 学会等名: CSH Meeting on Retroviruses
  • 発表場所: Cold Spring Harbor, NY, USA
  • 年月日: 20070522-27
• [学会発表] The specific phase of membrane-spanning helix of hiv-1 gp41 is critical for intracellular transport of env (2007)
  • 著者名/発表者名: Rosuke Miyauchi, Rachael Curran, Erin Matthews, Jun Komano, Tsutomu Murakami, Naoki Yamamoto, Donald M Engelman, and Zene Matsuda
  • 学会等名: CSH Meeting on Retroviruses
  • 発表場所: Cold Spring Harbor, NY, USA
  • 年月日: 20070522-27