過形成副甲状腺に対する遺伝子導入とアポトーシス誘導に関する分子生物学的研究

2006 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18689020
• 研究機関: 和歌山県立医科大学
• 研究代表者: 椎崎 和弘 和歌山県立医科大学, 医学部, 学内助手 (10423930)
• キーワード: 慢性腎不全 / 二次性副甲状腺機能亢進症 / 遺伝子導入 / ビタミンD受容体 / Ca感受受容体 / アポトーシス

研究概要

副甲状腺細胞のvitamin D receptor(VDR)およびCa-sensing receptor(CaSR)が著明に減少している進行した二次性副甲状腺機能亢進症(SHPT)のモデル動物に対し、VDRおよびCaSR遺伝子導入の副甲状腺細胞における効果とapoptosis誘導について検討した。
部分腎摘出術後、高リン(P)・低Ca食で8週間飼育したSDラットに対し、外科的に副甲状腺を剥離し、顕微鏡下にてVDR・CaSR・LacZを導入したアデノウィルスを副甲状腺内に直接注入した。24時間後に副甲状腺を摘出し、免疫組織学的VDRおよびCaSR染色、TUNEL染色、DNA電気泳動、電子顕微鏡による形態学的評価をした。注入前および副甲状腺摘出直前の血清Ca・P・intact-PTH値の変化を各遺伝子導入間で比較した。
VDR遺伝子導入された副甲状腺では、VDR陽性副甲状腺細胞数がその他の遺伝子を導入された副甲状腺と比較して、有意に高値であった。CaSR遺伝子導入についても同様であった。また、VDRおよびCaSR遺伝子導入された副甲状腺では、LacZ遺伝子を導入した副甲状腺と比較してTUNEL陽性副甲状腺細胞数が有意に高値であり、DNA電気泳動および電子顕微鏡的に副甲状腺細胞のapoptosis誘導が確認された。さらに同一ラットに対し、一側ずつの異なる遺伝子を導入することにより、同様の結果を確認した。血清intact-PTH値はVDRおよびCaSR遺伝子を導入後、有意に低下した。
アデノウィルスによるVDRおよびCaSR遺伝子導入は、副甲状腺細胞にこれらの蛋白を発現させ、vitamin DやCaに対する感受性の改善によるPTHの低下や副甲状腺細胞のapoptosisを誘導することが示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Direct maxacalcitol injection into hyperplastic parathyroids improves skeletal changes in secondary hyperparathyroidism. (2006)
  • 著者名/発表者名: Shiizaki K, Hatamura I, Negi S, Sakaguchi T, Saji F, Kunimoto K, Okamoto M et al.
  • 雑誌名: Kidney International 70 ページ: 486-495
• [雑誌論文] Direct injection of calcitriol or its analog into hyperplastic parathyroid glands induces apoptosis of parathyroid cell. (2006)
  • 著者名/発表者名: Shiizaki K, Negi S, Hatamura I, Tatsuta K, Shibata M, Shimada S, Sakaguchi T et al.
  • 雑誌名: Kidney International 70 Supple,102 ページ: S12-S15
• [雑誌論文] Up-regulation of Cbfa1 and Pit-1 in calcified artery of uraemic rats with severe hyperphosphataemia and secondary hyperparathyroidism. (2006)
  • 著者名/発表者名: Mizobuchi M, Ogata H, Hatamura I, Koiwa F, Saji F, Shiizaki K, Negi S et al.
  • 雑誌名: Nephrology Dialysis Transplantation 21 ページ: 911-916