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家族性乳癌原因遺伝子BRCA1は重要な癌抑制遺伝子で、胚細胞変異による卵巣癌発症リスクは約40%、乳癌発症リスクは約65%とされ、散発性癌に比較し若年発症で、両側乳癌や多臓器重複癌の頻度が高い。BRCA 1は、転写制御、 DNA修復、細胞周期制御、クロマチンリモデリングなどの細胞内の多様な機構に関与するとされるが、癌抑制遺伝子としてDNA修復に関する機能が特に注目されている。本研究は、BRCA1のDNA修復能に関する詳紬な解析により、乳癌、卵巣癌の発症機構の解明、新たな治療薬となる分子標的の探索、さらには乳癌、卵巣癌の予防法解明にも寄与することを目標としている。
共焦点レーザー顕微鏡を用いて、レーザーを細胞核の一部に照射し、線量を増加させることにより、DNA単鎖切断、二重鎖切断、塩基損傷などのさまざまなDNA損傷を作成し、それぞれの損傷に対するBRCA1の集積と解離をリアルタイムで解析した。その中で、 DNA二重鎖切断への集積をBRCA1の各種欠失変異体を用いて解析したところ、BRCA1のN末端とC末端がその集積に重要であることが分かった。また、DNA修復タンパク欠失細胞を用いて、その集積を観察したところ、それぞれ別のタンパクに依存して集積することが分かった。
また、これまでの研究過程で、BRCA1のわずか100アミノ酸の断片のみで、核内のDNA障害部位に集積する能力があることがリアルタイム解析で明らかにしている。この断片の機能を解析するため、tagを付加したタンパクを大量調整し、複合タンパク体を精製するために、この断片を安定発現する細胞作製し、現在大量培養を行っている。
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