| 研究概要 |
シロイヌナズナのxylogenタンパク質XYP1,XYP2とGFPの融合タンパク質(XYP1-GFP, XYP2-GFP)を各ネイティブプロモーター下で発現する形質転換体を作製した。XYP1-GFPは胚で最も多く蓄積しており、XYP2-GFPは維管束特異的な発現を示した。これらの発現・蓄積パターンはmRNAの発現パターンとほぼ一致していた。細胞レベルではXYP1-GFP・XYP2-GFPのいずれも細胞膜・細胞壁に局在した。また、XYP1-GFPについてはGPIアンカーと糖鎖が付加されることがわかった。また、xyp1変異体においてXYP1-GFPを発現させると変異体の表現型が回復することが示唆された。
XYP1・XYP2の輸送を制御する因子を解析するため、各種変異体におけるXYP1-GFP・XYP2-GFPの局在を解析した。van3,van4,van5,cvp1変異体では、XYP1-GFPの局在に変化は見られず、これらの遺伝子はxylogenの局在に必要ないことがわかった。一方、van7/gnomではXYP1-GFPが細胞内部のコンパートメントに蓄積しやすかった。GNOMはbrefeldin A感受性のADP ribosylation factor-guanine exchange factor(ARF-GEF)であるため、brefeldin Aの効果について検討したところ、brefeldin A処理によりXYP1-GFPがエンドソームに局在した。これらの結果から、XYP1はエンドソームと細胞膜間をリサイクリングしており、エンドソームから細胞膜への輸送がGNOMにより制御されていることがわかった。また、XYP1の細胞膜からエンドソームへの輸送はオーキシンにより制御されていることが示唆された。
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