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Cdc2キナーゼとサイクリンBの複合体である卵成熟/M期促進因子(MPF)は真核細胞の有糸分裂期(M期)の進行に中心的な役割を果す。脊椎動物において、サイクリンBは複数のサブタイプが存在することから、その機能分化が考えられる。ノックアウトマウスの実験から、サイクリンB1がMPFとして機能するB型サイクリンの原型であり、B1で代用可能なB2は重要でないとされ、サブタイプ間の機能分化の解明は進んでいない。しかし、脊椎動物以外のB型サイクリンの局在シグナルのアミノ酸配列は、サイクリンB1よりもむしろB2の方に相同性を示すことや、ツメガエル卵母細胞の第一減数分裂期の紡錘体形成にB2が必要であることから、B2に重要な機能があることが示唆される。そこで、我々はサイクリンB1、B2の機能差を解明するべく、本実験を行っている。
サイクリンB2局在シグナルの過剰発現は、卵成熟の紡錘体形成を阻害することから、その局在の重要性が考えられる。そこで、B1には反応しない抗サイクリンB2抗体を作製し、ツメガエル卵母細胞における内在性B2の細胞内局在をパラフィン切片にて調べた。その結果、核膜周辺部に強い染色域があることが明らかとなったが、局在シグナルを過剰発現した際のその染色域の変化は不明確であったことから、より詳細な検討を続けている。
また、サイクリンB2の紡錘体形成におけるモータータンパクの検討行った。その結果、二極性キネシンが紡錘体形成不全をやや改善する傾向を示した。この二極性キネシンは、パラフィン切片の免疫染色法では内在性サイクリンB2の局在域と重複するが、ウエスタンブロット法による活性化時間への影響については、明確な結果が得られなかったため、更なる検討を続けている。
順調な研究の進展を報告すると共に、関係諸氏のご協力に心から感謝致します。
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