| 研究概要 |
メガリンは腎臓近位尿細管上皮細胞の管腔側に発現するエンドサイトーシス受容体である。アルブミンや薬剤などの再吸収に重要な働きをしている。メガリンのエンドサイトーシスにはDab2やARHなどのアダプター蛋白の関与が重要であることが知られている。メガリンのエンドサイトーシス機構を解明するためにメガリンやそのアダプター蛋白に対する抗体を用いた免疫沈降法を行い、これらと分子学的複合体を形成する分子群を同定した。ラットの腎臓ライセートと抗ARH抗体を用いた免疫沈降法から、ARHはモーター蛋白の一種であるdyneinと複合体を形成していることが明らかになった。ARHはメガリンが細胞内を移動する際に終始共局在することから、メガリンの細胞内移動にもARHを介したdyneinの関与が推察される(Lehtonen S, et al. Molecular Biology of the Cell, 2008, p2949-2961)。ラット近位尿細管由来の培養細胞であるIRPTCと抗メガリン抗体を用いた免疫沈降からnon-muscle muosin heavy chain IIA(NMHC-IIA)が検出された。メガリンとNMHC-IIAの結合はDab2を介して行われることも明らかになった。NMHC-IIAの機能阻害薬であるblebbistatinを培養上清に添加すると、メガリンは細胞表面にとどまり、メガリンのリガンドを添加してもエンドサイトーシスが起こりづらくなることが明らかになった。このことからNMHC-IIAはメガリンのエンドサイトーシスのinitial stepを調節する因子である可能性が示唆された(Hosaka K, et.al. Kidney international, in press)。Angiotensin II ATla受容体を強制発現させたOK細胞にangiotensin IIを添加するとメガリンの発現が減弱することが明らかになった。メガリンの発現調節にはERKやinsulin-IRS/PI3K系のシグナリングが相互に関わっていることも明らかになった(Hosojima M, et.al. Endocrinology, 2009, p871-878)。今後、メガリンの発現調節やエンドサイトーシス機序のさらなる解明を続けたい。
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