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本研究は人工角膜作製を目指した人工角膜実質の構築を目的としている.生体組織に近いマテリアルの開発のためには組織本来の細胞を用いることが望ましく、恒常的に安定な細胞の供給のため、組織幹細胞の分離・培養法の確立が必要であった.そこでまず、実験動物(マウス)を用いた検討を行った結果、角膜実質細胞の分離と長期培養に成功した.更に、この細胞を角膜実質幹細胞としてキャラクタライゼイションを行い、角膜実質が本来由来している神経堤幹細胞の性質も持っていることを明らかにした.この結果は、「Isolation of multipotent neural crest-derived stem cells from the adult mouse cornea」として、英文科学誌「Invest Ophthalmol Vis Sci.」に発表することが出来た.さらに、この成果を応用して、ヒト角膜実質からの同様な細胞の分離・培養にも成功しつつある.また、分離した角膜実質幹細胞を元に、フィブリンゲル、およびコラーゲンゲル中での細胞培養を様々な培養条件下で検討しており、生体組織中の角膜実質細胞に近い形態を保った培養条件を確立しつつある.この培養条件下での、ケラトカンをはじめとするマーカーの発現についてRT-PCRおよび免疫染色法によって確認を行っている.
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