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ラット臼歯にEr:YAGレーザーもしくは回転切削器具で窩洞形成を行った後、グラスアイオノマーセメントで修復処置を施し、継時的に以下の組織学的・免疫組織化学的検索を行った。
組織学的・免疫組織化学的検索
光顕免疫組織化学的観察
酵素抗体法ならびに蛍光抗体法により、窩洞形成後の反応の相違を解析した。
1.細胞/前駆細胞マーカー(nestin)発現細胞の局在変化、歯髄中の5-bromo-2'-deoxyuridine(BrdU)陽性細胞の動態
Nestin陽性細胞において、1日後にはほぼ消失するも、2日後から増加が認められる。また、BrdU陽性細胞では、窩洞形成1日まではほとんど認められないが、2日後および3日後にはかなり増殖活性が認められ、その後減少する。
今年度は、窩洞形成の術式の確立および各種マーカーに対する免疫組織化学的検出条件の確立を中心として検索を進めた。窩洞深さに関しては、象牙質の半分程度とほぼ規定することができ、また、nestin及びBrdUの検出条件は概ね確立された。
今後、各種マーカー陽性細胞の経時的変化の検索を進めるとともに、画像解析法により各種検索対象細胞の分布密度や修復象牙質形成量の変化を統計学的に検討するとともに、各種免疫担当細胞(樹状細胞およびマクロファージ亜群)の超微形態と象牙質/歯髄複合体の修復過程との関連を追究する予定である。
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