研究課題
麹菌Aspergillus oryzaeのオリゴ糖分解酵素をコードする遺伝子の破壊とその表現型の解析、新規オリゴ糖分解酵素の探索と解析、また、オリゴ糖分解酵素をコードする遺伝子のプロモーター解析を実施した。オリゴ糖存在下において発現が誘導され、また、そのオリゴ等の分解に関与する酵素（イソプリメべロース生成酵素など）をコードする複数の遺伝子の欠損株を作成し、オリゴ糖もしくは当該オリゴ糖が分解されて生成される単糖を炭素源とする培地で培養した。遺伝子欠損株では、オリゴ糖を分解する能力が著しく低下し、部分的にトリミングされたオリゴ糖が蓄積することが明らかになった。このことから、これまでに単離したオリゴ糖分解酵素が麹菌においてオリゴ糖の資化に必須であることが示唆された。また、オリゴ糖分解酵素の欠損株では、培養液中の他の分解酵素の活性も低下する傾向が観察され、オリゴ糖の部分分解物も分解酵素遺伝子の発現に影響を与えている可能性が示唆された。キシログルカン（植物の細胞壁や種子に含まれる多糖類）に由来するオリゴ糖の分解に関与する新規細胞外α-キシロシダーゼの同定に成功し、当該酵素とβ-グルコシダーゼが協調的にオリゴ糖を分解する機構を見出し、当初想定していたよりも麹菌のキシログルカン由来オリゴ糖の分解に関与する酵素が多いこと、また、これらの酵素によって生成されるオリゴ糖の種類が豊富であることが明らかになった。オリゴ糖存在下において発現が誘導される複数の遺伝子のプロモーター領域を対象に、Yeast One-Hybrid法によって当該プロモーター領域に結合する因子の探索の検討を進めた。また、A. oryzae以外の糸状菌においてもオリゴ糖分解酵素等の解析を進めた。
令和3年度が最終年度であるため、記入しない。
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Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry
巻: - ページ: -
10.1093/bbb/zbac058
Applied Microbiology and Biotechnology
巻: 106 ページ: 675～687
10.1007/s00253-021-11744-7
