| 研究課題/領域番号 |
18H02159
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| 研究機関 | 富山県立大学 |
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研究代表者 |
生城 真一 富山県立大学, 工学部, 教授 (50244679)
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| 研究分担者 |
戸田 弘 富山県立大学, 工学部, 講師 (60608321)
伊藤 伸哉 富山県立大学, 工学部, 教授 (90213066)
西川 美宇 富山県立大学, 工学部, 助教 (90749805)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| キーワード | ポリフェノール動態 / グルクロン酸抱合 / 硫酸抱合 / 加水分解酵素 |
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| 研究実績の概要 |
(1)生体内におけるポリフェノール動態を精密に解析するために、抱合代謝物の網羅的な合成をおこなった。異物代謝酵素発現酵母株を用いてスチルべノイドの一種であるピセアタンノールのグルクロン酸、硫酸およびメチル化抱合体１７種について酵素合成した。各代謝物についてはMSおよびNMR分析によって抱合基の数および位置の構造同定をおこなった。ピセアタンノール投与ラットにおける血中代謝物の定量同定するために、標準代謝物を用いてMS分析の条件を検討した。
(2) 土壌由来メタゲノム約140サンプルを対象として、縮重プライマーを用いたPCRを行いBeta-グルクロニダーゼ(GUS)遺伝子の増幅を試みた。8サンプルのメタゲノムにおいて有意な約1.6kbpのバンドの増幅が確認され、それらのバンドの精製を行った。精製したDNA増幅断片をNanopore DNA シーケンサーを用いて解析した結果、約20万リードの塩基配列を得ることができた。それのうち3万リードがGUS遺伝子と推測され、Faecalibacterium prausnitzii、Neobacillus bataviensisおよびChlorobi bacterium 由来GUS遺伝子と約80%の相同性を有する遺伝子をクローニングできた。現在この遺伝子の発現及びGUS活性を解析中である。
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| 現在までの達成度 (段落) |
令和2年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
令和2年度が最終年度であるため、記入しない。
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