研究実績の概要 |
すべての生物に共通した基本的な生命現象として,細胞質で新規に合成されたタンパク質の膜透過・膜組込みがある。これらの反応を達成するために,生体膜には全生物に保存された膜タンパク質複合体Secトランスロコン(真正細菌ではSecYEG)を中心とした超分子複合体が存在する。バクテリアでは「SecA, SecYEG, SecDF, YidC から構成されるSecトランスロコンを含む複合体」が存在する。代表者らを含むいくつかのグループによって,これら各構成因子の立体構造情報が報告され,タンパク質輸送の分子メカニズムの詳細が明らかとなりつつある。しかしながら,未だ「Secトランスロコンを含む超分子複合体の全体像(全像)」は解明されていない。本研究ではこの膜タンパク質超分子複合体の構造決定を行い,新たに得られた構造情報に基づく機能解析から,タンパク質の膜透過・膜組込みの分子メカニズムの詳細を解き明かすことを目標として進めた。該当研究機関内に、ある基質蛋白質を透過させる最小ユニットをナノディスクに再構成し、その膜透過の様子を顕微鏡で捉えることに成功た。これらの結果を原著論文投稿に向けて準備を進めた。並行して、SecYEGを含む超分子複合体のX線結晶構造解析を目指して結晶化にも取り組んだ。精密化中のSecYEGを含む超分子複合体の構造では、これまでの知見と異なるSec間の相互作用が確認された。これが真に生体内での相互作用を示しているのかについて、部位特異的変異導入による生体内架橋実験を行い検証を進めた。
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