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フェニル酢酸（PAA）は重力方向に極性移動しないユニークな特性をもつ天然オーキシンであるが、植物におけるPAAの生合成や生理的役割はまだ解明されていない。今年度はシロイヌナズナにおいてPAAの生合成に寄与する可能性のあるTAR3およびTAR4遺伝子を解析した。これらの遺伝子産物であるTAR3およびTAR4タンパク質は、弱いながらもフェニルアラニンからフェニルピルビン酸（PPY）を生成する酵素活性をもつことを前年度までに明らかにしてきた。そこで、シロイヌナズナを用いてTAR3およびTAR4遺伝子の過剰発現体をそれぞれ作成した。しかし、いずれにおいてもオーキシンに関連した明確な表現型は見られなかった。PAAの内生量や、主要なオーキシンであるIAAの量にも変化は認められなかった。続いて、CRISPR/Cas9ゲノム編集技術によりシロイヌナズナのtar3 tar4二重欠損変異体を作成した。現在、その表現型解析とオーキシン代謝物分析を進めている。
IAAをグルコシル化するシロイヌナズナのオーキシン代謝酵素UGT84B1について、PAAの量的調節への関与を調べた。大腸菌で調製したUGT84B1タンパク質は、IAAだけでなくPAAに対してもUDP-グルコシル基転移酵素活性を示した。また、IAAよりもPAAに対して、より高い親和性を示すことも明らかになった。シロイヌナズナのugt84b1欠損変異体では、IAAとPAA両方の内生量が増加したことから、UGT84B1はこれら２種のオーキシンの代謝調節に関与していることが明らかになった。一方、ugt84b1欠損変異体におけるIAA-グルコースの減少量は僅かであった。このことから、シロイヌナズナにはUGT84B1以外にも重要な役割を果たすオーキシン配糖体化酵素が存在している可能性が強く示唆された。
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