| 研究課題/領域番号 |
18H02613
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
横林 しほり 京都大学, iPS細胞研究所, 特定拠点助教 (20615736)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | 始原生殖細胞 / 哺乳類 / 多能性幹細胞 / in vitro誘導系 / クロマチン高次構造 |
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| 研究実績の概要 |
生殖細胞は次世代へのゲノム情報の伝播を担う唯一の細胞系譜である。哺乳類では、生殖細胞の発生初期、即ち始原生殖細胞の発生期にゲノムワイドなエピゲノム変化（メチル化DNAの減少およびヒストン修飾の変化）が観察される。このエピゲノム変化は、おそらくその後の生殖細胞発生を正常に行うために不可欠な分子イベントであると予想されるが、しかし生殖細胞発生過程において果たす役割の分子的理解は未だ不十分である。近年、マウス多能性幹細胞から始原生殖細胞(primordial germ cell; PGC)様細胞を誘導する系が報告され、さらに、研究代表者らはヒト多能性幹細胞からPGC様細胞を分化誘導する系を報告した。本研究では、これらの試験管内誘導系を用いて、始原生殖細胞発生過程におけるクロマチン構造を詳細に解析し、エピゲノム再編成とクロマチン構造動態との関係を分子的に理解することを目的とする。
令和元年度は、平成30年度に引き続き、ChIPseqデータの取得を行った。PGC様細胞誘導過程におけるエピゲノム状態のダイナミクスの理解を目指し、より広範なエピゲノム修飾を標的として実験を進めた。また、クロマチン相互作用解析法については、まず手法の比較・条件検討を行った。その結果、良好な結果が得られる実験系の確立に成功したため、データ取得を進めた。さらに、これらの次世代シークエンスデータを解析するための解析パイプラインの構築を進めた。今後は必要なデータ取得をさらに進めるとともに、取得した種々のデータの統合解析を進めていく予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
現在のところ、種々のNGS解析手法プロトコルのマウスPGC様細胞誘導系への適用・データ取得が概ね順調に進んでいる。また、取得したデータの解析パイプラインの構築も概ね順調に進んでいる。
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| 今後の研究の推進方策 |
昨年度確立した解析手法を用いて、引き続きデータ取得を行う。これまでに報告されているトランスクリプトームおよびメチル化DNAデータ等と統合することにより、エピゲノム状態とクロマチン構造の関係を包括的に解析していく予定である。
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