| 研究実績の概要 |
本年度は、細胞膜リン脂質の非対称性の樹立・維持に関与するフリッパーゼについての生化学的特性を解析した。具体的に細胞内膜系に局在するP4-ATPase (ATP8A1, ATP9A, ATP9B, ATP10B, ATP11B)にFLAGタグを付加し、HEK293細胞に発現させ、抗FLAG抗体を用いて精製、試験管内でPtdSerを基質としたATPase活性を評価し、いくつかのメンバーにPtdSerに依存的なATPase活性の上昇が確認された。ついで、これらのメンバーの遺伝子を欠損させた細胞株をCRISPR-Cas9法で樹立し、それらの細胞膜PtdSerの膜動態を解析した。その結果、いくつかの変異体でPtdSerの膜動態に異常が生じていることを見出した。今後、さらに解析を続ける予定である。
|
