ドライバー変異に依存しない肺腺癌における細胞の分化と生存の統合的制御機構の解明

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18H02634
• 研究機関: 自治医科大学
• 研究代表者: 仁木 利郎 自治医科大学, 医学部, 教授 (90198424)
• 研究分担者: 萩原 弘一 自治医科大学, 医学部, 教授 (00240705) ; 遠藤 俊輔 自治医科大学, 医学部, 教授 (10245037) ; 佐久間 裕司 札幌医科大学, 医学部, 准教授 (10364514) ; 吉本 多一郎 自治医科大学, 医学部, 講師 (20634166) ; 松原 大祐 自治医科大学, 医学部, 准教授 (80415554)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: 肺腺癌

研究実績の概要

肺癌症例におけるドライバー変異、分化形質と臨床病理学的因子、予後との関係を明らかにするため、以下の検討を行った。
１）これまでに集積した肺腺癌400症例の凍結検体のうち、100症例につき、次世代シーケンサによるEGFR, KRAS, ALK, RET, BRAF, HER2などドライバー変異のhigh-throughput 解析を行った。
２）上記症例中、予後の判明している260症例について、TTF-1, E-cadherin, BRG1, HNF4A, MUC5AC, CK20の発現を免疫組織学的に解析した。
３）既報のnon-TRU typeの形態を示す肺腺癌43症例 (Matsubara et al. Cancer Sci 2017, PMID: 28677170) について、A)上皮全般の分化マーカー(E-cadherin, CK7, GRHL2, ELF3), B)末梢気管支上皮～肺胞上皮 のマーカー(TTF-1, Napsin A), C)消化管上皮のマーカー(HNF4-α, TFF-1, FOXA1, FOXA2, MUC5AC, MUC5B, MUC6), D)EMT関連因子 (ZEB1, snail, slug, vimentin)の発現を免疫染色により解析を行っている。
上記の１）～３）の検討により、TTF-1と逆相関する因子としてTFF-1 (trefoil factor-1)が選出されてきたため、その臨床病理学的な解析、予後因子としての解析を詳細に行い、TFF-1がnon-TRU typeの肺腺癌のマーカーであり、stageⅢ以上の症例において予後不良因子となること、さらにノックダウン実験を行い、TFF-1陽性の肺癌細胞では、細胞の増殖・生存がTFF-1に依存していることを明らかにした。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

肺癌検体を用いたドライバー変異の解析,分化マーカーの発現は順調に進んでいる。有望なマーカーの一つとしてすでにTFF-1を選出し、その臨床病理学的な解析、ノックダウンによる解析を行い、その結果は現在、すでに論文にまとめ投稿中である。

今後の研究の推進方策

１）凍結検体を用いた肺腺癌症例のドライバー変異の解析を継続する。
２）non-TRU typeの形態を示す肺腺癌43症例についての分化マーカーの発現解析を継続する。有望な結果が得られたものについては、さらに多数症例での解析を行い、ドライバー変異や臨床病理学的因子、予後との関連を明らかにする。３）有望なマーカー遺伝子については、肺腺癌細胞株を用いたノックダウン実験や強制発現実験を行い、細胞増殖、生存などの細胞生物学的な解析を行うとともに、分化形質に与える影響を調べる。

研究成果

• [雑誌論文] Survivin knockdown induces senescence in TTF1-expressing, KRAS-mutant lung adenocarcinomas. (2018)
  • 著者名/発表者名: Sumi T, Hirai S, Yamaguchi M, Tanaka Y, Tada M, Yamada G, Hasegawa T, Miyagi Y, Niki T, Watanabe A, Takahashi H, Sakuma Y.
  • 雑誌名: International Journal of Oncology 巻: 53 ページ: 33-46
  • DOI: doi: 10.3892/ijo.2018.4365.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Trametinib downregulates survivin expression in RB1-positive KRAS-mutant lung adenocarcinoma cells. (2018)
  • 著者名/発表者名: Sumi T, Hirai S, Yamaguchi M, Tanaka Y, Tada M, Niki T, Takahashi H, Sakuma Y.
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 501 ページ: 253-258
  • DOI: doi: 10.1016/j.bbrc.2018.04.230.
  • 査読あり
• [学会発表] Reciprocal expressions of TFF-1 and TTF-1 in lung adenocarcinomas. (2018)
  • 著者名/発表者名: ３１．Matsubara D, Soda M, Yoshimoto T, Amano Y, Kihara A, Sakuma Y, Endo S, Hagiwara K, Fukayama M, Mano H, Niki T.
  • 学会等名: Annual Meeting of American Association for Cancer Research
  • 国際学会
• [備考] 自治医科大学病理学講座統合病理学部門ホームページ
  • URL: https://www.jichi.ac.jp/pathol/index.html