| 研究課題/領域番号 |
18H02659
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| 研究機関 | 国立感染症研究所 |
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研究代表者 |
大西 真 国立感染症研究所, 副所長, 副所長 (10233214)
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| 研究分担者 |
志牟田 健 国立感染症研究所, 細菌第一部, 主任研究官 (40370960)
中山 周一 国立感染症研究所, 細菌第一部, 主任研究官 (80280767)
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| 研究期間 (年度) |
2018-04-01 – 2022-03-31
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| キーワード | 淋菌 / 形質転換 / 薬剤耐性 |
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| 研究実績の概要 |
前年度までに、CRO感受性淋菌を用いてTransformantを得ることの出来なかったCRO低感受性非病原性ナイセリア属菌2株について、最初にCRO感受性非病原性ナイセリア属菌をRecipient、CRO低感受性非病原性ナイセリア属菌2株のgenomic DNAをDonor DNAとし形質転換実験を行い、非病原性ナイセリア属菌間の自然形質転換によるCRO低感受性非病原性ナイセリア属菌のTransformant を取得した。得られたTransformantのCROに対するMIC値はdonor株と同等の値を示した。Transformantのドラフトゲノム配列(Illumina MiSeq)を取得し、penA遺伝子領域を中心に約6kbpの配列を抽出した後、解析を行いTransformantのpenA遺伝子は、それぞれ、CRO低感受性非病原性ナイセリア属菌のpenA遺伝子全長を含む領域と組み変わっていることを確認した。よって、得られたTransformantのCROのMICの上昇はpenA遺伝子依存的であることが示唆された。次に、得られたTransformant (非病原性ナイセリア属菌)のgenomic DNAをDonor DNAとしCRO感受性淋菌に自然形質転換し、donor株と同等のCROに対するMIC値を示すTransformant (淋菌株)を得た。先と同様の方法で、penA遺伝子領域の解析を行い、このTransformantにはCRO低感受性非病原性ナイセリア属菌のpenA遺伝子の一部と組み変わっていることを確認し、TransformantのCROのMICの上昇はpenA遺伝子依存的であることを示した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
菌株の収集、ゲノム配列の取得、形質転換による耐性遺伝子の伝播について、おおむね順調に進展している。
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| 今後の研究の推進方策 |
細胞間の形質転換を実際に証明することと、その頻度に与える影響を検討するための基盤情報を得ることを目標とする。現実世界の中で起きた現象を試験管内で再現するために必要なツール、つまりドナー株の収集について本研究の中で進められてきたので、試験管内での再現方法に工夫を重ねる。
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