研究実績の概要 |
GPNMBは、増殖が停止した乳がん細胞で特異的に細胞表面に発現し、幹細胞性を誘導することで腫瘍性増殖をもたらす。この独自の研究成果(Okita et al., Sci Signal, 2017; Chen et al., Cancer Res., 2018)に基づき、増殖が停止したがん細胞でGPNMBが特異的に細胞表面に発現し、幹細胞性を誘導するシグナル機構を明らかにすることを本研究期間内の研究目的とした。GPNMBが幹細胞性に関わることを示した研究は他に例がない。GPNMBの幹細胞性誘導に必須の翻訳後修飾部分として、細胞外の糖化秋色部位ならびにリン酸化hemITAMに結合する抗体の作製を進めた。さらに、GPNMBを細胞表面に発現している休眠期の乳がん幹細胞を分取して、GPNMBのリン酸化hemITAMペプチドに結合する分子を免疫沈降させて超高感度質量分析によって同定するための準備を進めた。GPNMBを細胞表面に発現している休眠期がん細胞をFACSや磁気ビーズを用いたMACS法で分取し、幹細胞性を獲得した細胞を素早く大量に分取する基本技術も検討している。これらの結果から得たGPNMBの下流シグナル経路の候補分子のノックダウン実験を行い、休眠期の乳がん細胞における幹細胞性誘導のシグナル経路を解明する計画である。hemITAM以外にも幹細胞性誘導能を失うGPNMBの点変異体や欠失変異体も複数作製済である。また、患者のがんにおけるGPNMBの役割をさらに解析することを目的として、乳がん、膵がん、膀胱がんのオルガノイド培養と患者腫瘍組織異種移植モデルの作製も開始した。
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