TCRの抗原同定とTCR遺伝子療法に向けた副作用予測の基盤構築

2020 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18H02689
• 研究機関: 富山大学
• 研究代表者: 小澤 龍彦 富山大学, 学術研究部医学系, 准教授 (10432105)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: TCR / TCR遺伝子療法 / レパートリー解析 / ペプチド/MHC

研究実績の概要

がん患者より分離したがん浸潤リンパ球由来TCRが認識する抗原を同定する基盤を確立するために、1)がん細胞特異的TCRの取得、2)TCRの抗原同定、3)同定したペプチドからの抗原タンパク質予測、4)試験TCRの反応性の検証、の4工程を計画した。
がん細胞特異的TCRの取得のために、21症例の大腸がん患者、10症例の乳がん患者より分離した腫瘍浸潤リンパ球(TIL)由来CD8+/PD-1+細胞のTCRレパートリーを解析し、2019年度までにCancer Tissue-Originated Spheroid (CTOS)細胞に応答する計2種類のがん患者のTIL由来TCRを同定した。2020年度はこれらTCRのHLA拘束性を解析したが、HLAを特定することはできなかった。
また、TCRの反応性を検証ツールとして、ペプチド/MHCテトラマーが報告されている。しかしながら従来のペプチド/MHCテトラマーは、大腸菌で作製されており、リフォールディングなど困難な工程があり、容易に作製することは難しかった。そこで我々は、哺乳類細胞株を用いてリフォールディングの工程を行わずにペプチド/MHCを作製する方法を確立した。

現在までの達成度 (段落)

令和2年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和2年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Evaluation of SARS-CoV-2 neutralizing antibodies using a vesicular stomatitis virus possessing SARS-CoV-2 spike protein (2021)
  • 著者名/発表者名: Tani Hideki、Kimura Miyuki、Tan Long、Yoshida Yoshihiro、Ozawa Tatsuhiko、Kishi Hiroyuki、Fukushi Shuetsu、Saijo Masayuki、Sano Kaori、Suzuki Tadaki、Kawasuji Hitoshi、Ueno Akitoshi、Miyajima Yuki、Fukui Yasutaka、Sakamaki Ippei、Yamamoto Yoshihiro、Morinaga Yoshitomo
  • 雑誌名: Virology Journal 巻: 18 ページ: 16
  • DOI: 10.1186/s12985-021-01490-7
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Characterization of pseudotyped vesicular stomatitis virus bearing the heartland virus envelope glycoprotein (2021)
  • 著者名/発表者名: Kimura Miyuki、Egawa Kazutaka、Ozawa Tatsuhiko、Kishi Hiroyuki、Shimojima Masayuki、Taniguchi Satoshi、Fukushi Shuetsu、Fujii Hikaru、Yamada Hiroshi、Tan Long、Sano Kaori、Katano Harutaka、Suzuki Tadaki、Morikawa Shigeru、Saijo Masayuki、Tani Hideki
  • 雑誌名: Virology 巻: 556 ページ: 124～132
  • DOI: 10.1016/j.virol.2020.10.006
  • 査読あり
• [雑誌論文] Rapid and efficient generation of T‐cell receptor‐like antibodies using chip‐based single‐cell analysis (2021)
  • 著者名/発表者名: Ozawa Tatsuhiko、Kobayashi Eiji、Hamana Hiroshi、Nakamura Tomoko、Lyu Fulian、Hayashi Atsushi、Muraguchi Atsushi、Kishi Hiroyuki
  • 雑誌名: European Journal of Immunology 巻: in press ページ: in press
  • DOI: 10.1002/eji.202049083
  • 査読あり
• [雑誌論文] Relationship between T cell receptor clonotype and PD‐1 expression of tumor‐infiltrating lymphocytes in colorectal cancer (2020)
  • 著者名/発表者名: Sukegawa Kenta、Shitaoka Kiyomi、Hamana Hiroshi、Kobayashi Eiji、Miyahara Yoshihiro、Fujii Keisuke、Tsuda Kei、Saeki Shiori、Nagata Takuya、Ozawa Tatsuhiko、Saito Shigeru、Fujii Tsutomu、Muraguchi Atsushi、Shiku Hiroshi、Kishi Hiroyuki
  • 雑誌名: European Journal of Immunology 巻: 50 ページ: 1580～1590
  • DOI: 10.1002/eji.201948399
  • 査読あり
• [雑誌論文] Physiologic Target, Molecular Evolution, and Pathogenic Functions of a Monoclonal Anti?Citrullinated Protein Antibody Obtained From a Patient With Rheumatoid Arthritis (2020)
  • 著者名/発表者名: Ozawa Tatsuhiko、Ouhara Kazuhisa、Tsuda Reina、Munenaga Syuichi、Kurihara Hidemi、Kohno Hiroki、Hamana Hiroshi、Kobayashi Eiji、Taki Hirofumi、Tobe Kazuyuki、Sugiyama Eiji、Muraguchi Atsushi、Kishi Hiroyuki
  • 雑誌名: Arthritis & Rheumatology 巻: 72 ページ: 2040～2049
  • DOI: 10.1002/art.41426
  • 査読あり
• [雑誌論文] A frequent nonsense mutation in exon 1 across certain HLA-A and -B alleles in leukocytes of patients with acquired aplastic anemia (2020)
  • 著者名/発表者名: Mizumaki H, Hosomichi K, Hosokawa K, Yoroidaka T, Imi T, Zaimoku Y, Katagiri T, Nguyen M A T, Tran D C, Elbadry M I Y, Chonabayashi K, Yoshida Y, Takamatsu H, Ozawa T, Azuma F, Kishi H, Fujii Y, Ogawa S, Tajima A, Nakao S.
  • 雑誌名: Haematologica 巻: in press ページ: in press
  • DOI: 10.3324/haematol.2020.247809
  • 査読あり
• [雑誌論文] Production of a rabbit monoclonal antibody for highly sensitive detection of citrus mosaic virus and related viruses (2020)
  • 著者名/発表者名: Miyoshi Shogo、Tokunaga Soh、Ozawa Tatsuhiko、Takeda Hiroyuki、Aono Mitsuo、Miyoshi Takanori、Kishi Hiroyuki、Muraguchi Atsushi、Shimizu Shin-ichi、Nozawa Akira、Sawasaki Tatsuya
  • 雑誌名: PLOS ONE 巻: 15 ページ: e0229196
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0229196
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of Porphyromonas gingivalis infection on gut dysbiosis and resultant arthritis exacerbation in mouse model (2020)
  • 著者名/発表者名: Hamamoto Yuta、Ouhara Kazuhisa、Munenaga Syuichi、Shoji Mikio、Ozawa Tatsuhiko、Hisatsune Jyunzo、Kado Isamu、Kajiya Mikihito、Matsuda Shinji、Kawai Toshihisa、Mizuno Noriyoshi、Fujita Tsuyoshi、Hirata Shintaro、Tanimoto Kotaro、Nakayama Koji、Kishi Hiroyuki、Sugiyama Eiji、Kurihara Hidemi
  • 雑誌名: Arthritis Research & Therapy 巻: 22 ページ: 249
  • DOI: 10.1186/s13075-020-02348-z
  • 査読あり
• [学会発表] Jurkat細胞を用いたTCRのネオアンチゲン反応性解析 (2020)
  • 著者名/発表者名: 浜名洋, 宮原慶裕, 下岡清美, 祐川健太, 小林栄治, 小澤龍彦, 村口篤, 藤井努, 珠玖洋, 岸裕幸
  • 学会等名: 第24回日本がん免疫学会総会
• [学会発表] ISAAC法を用いたTCR様抗体の迅速作製とその応用 (2020)
  • 著者名/発表者名: 小澤龍彦, 小林栄治, 浜名洋, 村口篤, 岸裕幸
  • 学会等名: 第24回日本がん免疫学会総会
• [学会発表] Development of a novel tumor antigen-specific TCR cloning system using a microarray chip. (2020)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi E, Ozawa T, Hamana H, Muraguchi A, Kishi H.
  • 学会等名: 第24回日本がん免疫学会総会
• [学会発表] 複数のエピトープと結合するモノクローナル抗体の認識機構ークラスター状結晶からの構造解析ー (2020)
  • 著者名/発表者名: 小林淳, 小澤龍彦, 正木秀幸, 加藤龍一
  • 学会等名: 日本結晶学会2020年度年会
• [学会発表] 新規マラリアワクチン候補PfRiprにより誘導されるウサギモノクローナル抗体の評価 (2020)
  • 著者名/発表者名: 徳永聡, 長岡ひかる, 小澤龍彦, 岸裕幸, 村口篤, 坪井敬文, 高島英造, 澤崎達也
  • 学会等名: 第43回日本分子生物学会